[发明专利]一种荧光淬灭恢复剂及其应用有效
申请号: | 202110125784.0 | 申请日: | 2021-01-29 |
公开(公告)号: | CN112798377B | 公开(公告)日: | 2023-03-17 |
发明(设计)人: | 姜云瀚 | 申请(专利权)人: | 四川大学华西医院 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30;G01N1/34;G01N21/64;G01N33/533 |
代理公司: | 成都熠邦鼎立专利代理有限公司 51263 | 代理人: | 曾克 |
地址: | 610041 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 荧光 恢复 及其 应用 | ||
本发明公开了一种荧光淬灭恢复剂及其应用,涉及免疫分析和生物技术应用领域,按体积份数计,由下列组分组成:35‑45份无水乙醇,55‑65份PBS溶液,荧光淬灭恢复剂的应用,包括如下步骤:A1:使用PBS溶液清洗荧光淬灭的组织切片或细胞样本,清洗次数为1‑2次,每次5min;A2:在组织切片或细胞样本上滴加所述的荧光淬灭恢复剂,室温孵育10min;A3:用PBS溶液清洗组织切片或细胞样本3次,每次5min,得到荧光淬灭恢复后的组织切片或细胞样本。可在荧光淬灭的免疫荧光样本上重新染色,保证重新染色免疫荧光样本的荧光能很好的显示,能增加免疫荧光实验的容错率,节约样本数量,节省实验时间。
技术领域
本发明涉及免疫分析和生物技术应用领域,具体涉及一种荧光淬灭恢复剂及其应用。
背景技术
免疫荧光常常是一次性的,即一次实验后马上用荧光显微镜或者激光共聚焦观察。但免疫荧光孵育荧光二抗后如果操作失误,例如,照射白光或者其他原因引起荧光淬灭,现有技术只能通过重新实验来弥补失误。如果实验样品珍贵,例如,少见疾病的组织样本或者需要长时间造模得到的实验样本,常常没有多余样本用于犯错。同时,对于珍贵的样本,想用免疫荧光检测多个指标,而现有免疫荧光技术最多只能检测五种颜色,还要受限于检测仪器的检测通道个数,这就导致需要的样本量增加,延长实验时间。
发明内容
本发明针对现有技术存在的问题,提供了一种荧光淬灭恢复剂及其应用,可在荧光淬灭的免疫荧光样本上重新染色,保证重新染色免疫荧光样本的荧光能很好的显示,能增加免疫荧光实验的容错率,节约样本数量,节省实验时间。
本发明通过下述技术方案实现:一种荧光淬灭恢复剂,按体积份数计,由下列组分组成:35-45份无水乙醇,55-65份PBS溶液。
进一步,根据权利要求1所述的一种荧光淬灭恢复剂,按体积份数计,由下列组分组成:40份无水乙醇,60份PBS溶液。
一种荧光淬灭恢复剂的应用,包括如下步骤:
A1:使用PBS溶液清洗荧光淬灭的组织切片或细胞样本,清洗次数为1-2次,每次5min;
A2:在组织切片或细胞样本上滴加所述的荧光淬灭恢复剂,室温孵育10min;
A3:用PBS溶液清洗组织切片或细胞样本3次,每次5min,得到荧光淬灭恢复后的组织切片或细胞样本。
上述至少包括以下优点:
1、本发明一种荧光淬灭恢复剂及其应用,可在荧光淬灭的免疫荧光样本上重新染色,保证重新染色免疫荧光样本的荧光能很好的显示,能增加免疫荧光实验的容错率,节约样本数量,节省实验时间;
2、本发明一种荧光淬灭恢复剂及其应用,对于一些样本需要二次拍照和检测的样本,荧光较弱,可通过荧光淬灭恢复剂的应用获得荧光增强的效果。
附图说明
此处所说明的附图用来提供对本发明实施例的进一步理解,构成本申请的一部分,并不构成对本发明实施例的限定。在附图中:
图1为荧光淬灭恢复剂的使用效果图;
图2为AF488组荧光染料的样本使用荧光淬灭恢复剂后效果图;
图3为FITC组荧光染料的样本使用荧光淬灭恢复剂后效果图;
图4为AF555组荧光染料的样本使用荧光淬灭恢复剂后效果图;
图5为TRITC组荧光染料的样本使用荧光淬灭恢复剂后效果图;
图6为CY3组荧光染料的样本使用荧光淬灭恢复剂后效果图;
图7为AF647组荧光染料的样本使用荧光淬灭恢复剂后效果图;
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