[发明专利]一种改善肿瘤微环境的钌基抗肿瘤纳米药物的制备方法

说明书

本发明涉及一种改善肿瘤微环境的钌基抗肿瘤纳米药物的制备方法，属于纳米药物技术领域，称取大豆卵磷脂、胆固醇和阿托伐醌，加无水乙醇溶解制得含阿托伐醌的脂质体脂相混合液，然后将其旋蒸使脂相成膜；将钌纳米颗粒用水重悬并向其中加入磷酸缓冲液，混匀后加入吐温80得到含钌的水相混合液；将水相混合液加至脂相膜中，混匀后超声。本发明可以阻断线粒体的呼吸链，缓解肿瘤组织的缺氧情况；释放的纳米酶能够利用增加的氧气消耗肿瘤部位的葡萄糖，减少ATP的产生，在对肿瘤部位进行饥饿治疗同时产生过氧化氢，同时利用肿瘤微环境的过氧化氢进行类芬顿反应产羟基自由基，从而实现良好的抗肿瘤效果；本发明制备方法简便易行，可以规模化生产。

技术领域

本发明涉及一种改善肿瘤微环境的钌基抗肿瘤纳米药物的制备方法，属于纳米药物技术领域。

背景技术

我国每年新发的恶性肿瘤约有380万人，死亡约30万人。虽然癌症的研究取得了一定的进展，但目前癌症仍然是发病率较高的疾病之一。目前常用的治疗方式有手术治疗、化学治疗、放射治疗、靶向治疗、免疫疗法、基因治疗和光疗等。这些治疗方法虽然都能起到一定的效果，但都有其局限性或者存在一定的毒副作用。

纳米酶作为一种很有前途的天然酶替代品，既具有酶的活性，又具有纳米材料的特性。钌（Ru）是铂族金属中的一员，但其成本较低；钌基纳米酶是最近新兴的纳米酶，肿瘤细胞内的糖酵解活跃，能利用葡萄糖在短时间内产生较多能量及代谢产物，而钌基纳米酶能够催化葡萄糖和O₂反应，消耗肿瘤细胞的能量来源。但这一反应过程需要氧气的参与，然而，研究发现，肿瘤组织及周边是一种极度缺氧的环境，氧含量的不足极大地限制了纳米酶治疗的效果。

因此，探索一种能够基于阻断肿瘤细胞内的糖酵解反应进而切断肿瘤能量供应，并且能够同时改善肿瘤缺氧环境的抗肿瘤作用的纳米药物，可以实现很好的抗肿瘤作用，具有重要的社会意义。

发明内容

本发明需要解决的技术问题是提供一种改善肿瘤微环境的钌基抗肿瘤纳米药物的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

一种改善肿瘤微环境的钌基抗肿瘤纳米药物的制备方法，所述钌基抗肿瘤纳米药物为澄清透明的钌/阿托伐醌脂质体，其制备方法包括以下步骤：

(1)分别称取一定量的大豆卵磷脂、胆固醇和阿托伐醌，加入无水乙醇溶解，制得含阿托伐醌的脂质体脂相混合液；

(2)将步骤（1）制备的含阿托伐醌的脂质体脂相混合液置于旋转蒸发仪上旋蒸，使脂相成膜；

(3)将钌纳米颗粒用一定量的水重悬后，向其中加入一定比例的磷酸缓冲液，混合均匀后加入一定量的吐温80，混合均匀，得到含钌的水相混合液；

(4)将步骤（3）得到的含钌的水相混合液加至步骤（2）制得的膜中；

(5)将步骤（4）得到的液体混匀后超声得到澄清透明的钌/阿托伐醌脂质体。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤（1）中脂相混合液的大豆卵磷脂、胆固醇、阿托伐醌和无水乙醇的配比为40-70 mg：4-7 mg：0.85-1.5 mg：8-12 mL。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤（2）中旋转蒸发仪的旋蒸温度为40-50℃，旋蒸时间为0.5-4 h。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤（3）中含钌的水相混合液的磷酸缓冲液、水和吐温80的体积比为400-500：9500-9600：5-15。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤（3）中的钌纳米颗粒是经硼氢化钠还原三氯化钌得到的钌纳米颗粒，所述钌纳米颗粒的大小为5-20 nm。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤（5）中的超声功率为200-800 W，超声时间为5-20 min。