[发明专利]双花千里光总黄酮的提取纯化方法

说明书

本发明公开了双花千里光总黄酮的提取纯化方法，包括：将双花千里光粉碎，过筛；向1重量份的双花千里光粉中加入10‑40重量份的乙醇溶液，60‑80℃下回流提取1‑2h，过滤，得第一滤液和第一滤渣；向第一滤渣中加入3‑5重量份的柠檬酸溶液，常温下搅拌1‑2h，然后进行冻融循环处理；向解冻后的混合液中加入5‑25重量份的乙醇溶液，50‑70℃下超声提取15‑25min，过滤，得第二滤液和第二滤渣；合并第一滤液和第二滤液，加入0.2‑0.3重量份的酵母粉，25‑35℃下搅拌22‑30min，离心，取上清液，减压浓缩，即得。本发明的方法可显著提高总黄酮的得率和纯度。

技术领域

本发明涉及天然产物提取领域。更具体地说，本发明涉及一种双花千里光总黄酮的提取纯化方法。

背景技术

藏药双花千里光(Senecio dianthus Franch)为菊科千里光属植物，以全草入药，具有清热解毒、祛风除湿和活血通络等功效。双花千里光中含有大量的黄酮类成分，为了深入研究双花千里光的药用价值，需要对黄酮类成分进行提取分离。现有的双花千里光总黄酮的提取方法主要是采用乙醇回流提取，研究方向集中在对乙醇回流提取的工艺进行优化，但其总黄酮的得率仍然偏低，有待改进。

发明内容

本发明的目的是提供一种双花千里光总黄酮的提取纯化方法，以提高总黄酮的得率和纯度。

为了实现根据本发明的目的和其它优点，提供了一种双花千里光总黄酮的提取纯化方法，包括如下步骤：

步骤一、将双花千里光粉碎，过60目筛，得双花千里光粉；

步骤二、向1重量份的双花千里光粉中加入10-40重量份的体积浓度为60-80％的乙醇溶液，60-80℃下回流提取1-2h，过滤，得第一滤液和第一滤渣；

步骤三、向第一滤渣中加入3-5重量份的质量浓度为10-15％的柠檬酸溶液，常温下搅拌1-2h，然后进行冻融循环处理；

步骤四、向解冻后的混合液中加入5-25重量份的体积浓度为60-80％的乙醇溶液，50-70℃下超声提取15-25min，过滤，得第二滤液和第二滤渣；

步骤五，合并第一滤液和第二滤液，加入0.2-0.3重量份的酵母粉，25-35℃下搅拌22-30min，离心，取上清液，减压浓缩，即得。

优选的是，所述的双花千里光总黄酮的提取纯化方法，步骤二中，乙醇溶液的体积浓度为70％，添加量为30重量份，回流提取温度为70℃，提取时间为1.5h。

优选的是，所述的双花千里光总黄酮的提取纯化方法，步骤三中，柠檬酸溶液的质量浓度为13％，添加量为5重量份，搅拌转速为200r/min，搅拌时间为1h。

优选的是，所述的双花千里光总黄酮的提取纯化方法，步骤三中，冻融循环处理具体为：先将混合液转入-18℃下冷冻8h，然后转入30℃下解冻，解冻后，将混合液以流速120ml/s通过磁场强度为600-800mT的磁化器，再将磁化后的混合液转入-18℃，进行下一次冻融循环处理，冻融循环处理至少3次。

优选的是，所述的双花千里光总黄酮的提取纯化方法，步骤四中，乙醇溶液的体积浓度为70％，添加量为20重量份，超声提取温度为60℃，超声功率为600w，频率为30KHz，提取时间为20min。

优选的是，所述的双花千里光总黄酮的提取纯化方法，步骤五中，酵母粉在加入滤液前进行了活化处理，具体为，将0.2-0.3重量份的酵母粉加入5重量份的质量浓度为4％的蔗糖溶液中，30℃下水浴振荡30min，再加入3重量份的第一滤液，继续水浴振荡15min，离心，取沉淀，洗涤。

优选的是，所述的双花千里光总黄酮的提取纯化方法，步骤五中，酵母粉的添加量为0.22重量份，搅拌温度30℃，搅拌转速为50r/min，搅拌时间为25min。