[发明专利]一种基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒及提取方法

权利要求书

1.一种基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的试剂包括裂解液、磁珠液、去蛋白漂洗液、去盐漂洗液和核酸洗脱液。

2.根据权利要求1所述基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒，其特征在于，所述裂解液包括：3-6mol/L胍盐、5-20％十二烷基硫酸钠、20-200mmol/L乙二胺四乙酸、10-100mmol/L三羟甲基氨基甲烷、100-1000mmol/L氯化钠、0.5％-5％脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠和表面活性剂。

3.根据权利要求2所述基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂为TritonX-100、Tween-20、Tween-80、PEG4000或NP-40中一种或几种。

4.根据权利要求1所述基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒，其特征在于，所述去蛋白漂洗液含有1-3mol/L胍盐、100-1000mmol/L氯化钠和体积比为80％的乙醇。

5.根据权利要求1所述一种基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒，其特征在于，所述去盐漂洗液为体积比为60-80％的乙醇。

6.根据权利要求1所述一种基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒，其特征在于，所述核酸洗脱液含有5-20mmol/L三羟甲基氨基甲烷。

7.利用权利要求1-6所述基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒的手工提取细菌核酸的方法，其特征在于，所述方法包括：

步骤一，样本离心处理得悬浮样本；

步骤二，所述悬浮样本中加入磁珠液和裂解液，涡旋混匀30s，磁力架吸附1min，弃上清；

步骤三，加入500μL的去蛋白漂洗液，涡旋混匀30s，磁力架吸附1min，弃上清；

步骤四，加入800μL的去盐漂洗液，涡旋混匀30s，磁力架吸附1min，弃上清；

步骤五，加入100μL的核酸洗脱液，65℃水浴加热10min洗脱核酸，即得提取的细菌核酸。

8.利用权利要求1-6所述基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒的自动化提取细菌核酸的方法，其特征在于，所述方法包括：

步骤一，将基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒中的试剂加入到预分板中，1、7列加入500μL去蛋白漂洗液，2、8列加入300μL裂解液，3、9列加入800μL去盐漂洗液，6、12列加入100μL核酸洗脱液；

步骤二，将200μL样本溶液加到预分板2、8列中；

步骤三，将预分板放入自动核酸提取仪中，运行程序，即得提取的细菌核酸。

9.根据权利要求8所述基于磁珠的快速提取细菌核酸的试剂盒的自动化提取细菌核酸的方法，其特征在于，所述样本溶液为临床待测样本或菌液。