[发明专利]一种皂角刺中黄酮类化合物皂荚新酮C的制备方法及其应用

说明书

本发明涉及皂角刺中黄酮类化合物皂荚新酮C的制备方法及其应用，可有效解决快速从皂角刺中提取黄酮类化合物皂荚新酮C，实现制备抗脓毒症急性肾损伤药物中的应用问题，其解决的技术方案是，其制备方法包括以下步骤：1）制备粗提取物；2）一次分离；3）二次分离；4）纯化；本发明制备方法分离效率高、时间短，溶剂消耗量小，样品回收率高，得到的目标成分纯度高，所得皂荚新酮C对脂多糖诱导的肾损伤具有较好的保护作用，有效用于制备治疗脓毒症或者其它感染因素引起的肾损伤的药物，是皂角刺中黄酮类化合物皂荚新酮C新用途上的创新。

技术领域

本发明涉及医药领域，特别是一种皂角刺中黄酮类化合物皂荚新酮C的制备方法及其应用。

背景技术

脓毒症是由感染引起的全身炎症反应，常常引起多组织损伤及功能障碍。目前，脓毒症已成为重症监护病房(ICU)患者死亡的主要原因，是1～7岁患儿的第七大致死原因和65～75岁老人的第八大致死原因，急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)是脓毒症常见并发症，是脓毒症患者病死率升高的独立危险因素，其严重程度与脓毒症的高病死率显著相关。随着我国人口老龄化的加剧、侵入性医疗手段和免疫抑制剂的应用，脓毒症急性肾损伤的发病率呈逐年升高趋势。有研究表明，住院脓毒症患者中急性肾损伤发病率为68.4％，院内死亡率高达30.2％。如何预防和治疗脓毒症并发症急性肾损伤，成为非常严峻的医学问题。

中草药在细胞保护方面的应用历史悠久，从中草药中寻找具有肾细胞保护的活性物质，研制特异性强、毒副作用小的新型药物具有重要的社会效益和经济效益。

皂角刺为皂荚属皂荚(Gleditsia sinensis Lam.)的干燥棘刺，又称皂刺、皂针、天丁等，具有消肿托毒、排脓、杀虫等功效。皂角刺广泛分布于我国河南、河北、江苏等省区，在日本、韩国也有广泛分布，全年均可采收。化学成分研究表明皂角刺主要含有黄酮类、酚酸类和萜类等成分，黄酮类化合物为皂角刺中主要活性成分，具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化等活性，但至今未见有从皂角刺中提取黄酮类化合物用于制备抗脓毒症急性肾损伤药物的公开报导。

发明内容

针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种皂角刺中黄酮类化合物皂荚新酮C的制备方法及其应用，可有效解决快速从皂角刺中提取黄酮类化合物皂荚新酮C，实现制备抗脓毒症急性肾损伤药物中的应用问题。

本发明解决的技术方案是，一种皂角刺中黄酮类化合物皂荚新酮C，分子结构式为：

其制备方法包括以下步骤：

1)制备粗提取物，方法是，将皂角刺粉碎，过40目筛，每次用皂角刺重量8～10倍的体积浓度为50％的含水丙酮溶液(体积比)，提取3次，每次2～3min，合并3次提取液，减压浓缩至相当于含生药量1.2g/mL的浓缩物，加浓缩物重量体积3～5倍量的蒸馏水混悬，再依次加入与混悬液等体积的石油醚、乙酸乙酯，减压回收溶剂，得到乙酸乙酯萃取部位的浸膏，即皂角刺粗提取物；所述的重量体积是指固体物以g计，液体物以mL计，以下同，如浓缩物为1g时，蒸馏水为3～5mL；

2)一次分离，方法是，乙酸乙酯萃取部位的浸膏经硅胶柱色谱初步分离，采用体积比为25:1、12:1的二氯甲烷-甲醇系统进行梯度洗脱，流速为20mL/min，每200mL为1个流份，每个梯度洗脱250min，收集一次分离的二氯甲烷-甲醇体积比为12:1洗脱流份；

3)二次分离，将一次分离的二氯甲烷-甲醇体积比为12:1洗脱流份再经硅胶柱色谱进一步分离，采用体积比为10:1、5:1的石油醚-乙酸乙酯系统进行梯度洗脱，流速为10mL/min，每50mL为1个流份，每个梯度洗脱120min，收集得二次分离的石油醚-乙酸乙酯体积比为5:1洗脱流份；