[发明专利]一种促进作物根系发育的微生物菌剂及其制备与应用

权利要求书

1.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂含有类芽孢杆菌和/或类芽孢杆菌的代谢物，所述微生物菌剂用于促进作物根系发育，所述类芽孢杆菌已于2015年12月30日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，其生物保藏编号为CGMCC No.1.15561。

2.根据权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于：所述作物为十字花科植物和/或谷物；和/或，所述类芽孢杆菌来源于喀斯特经果林根际土壤。

3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于：所述十字花科植物选自拟南芥、油菜、萝卜、卷心菜、白菜、甘蓝中的至少一种，所述谷物选自水稻、小麦中的至少一种。

4.根据权利要求1-3任一项所述的类芽孢杆菌和/或类芽孢杆菌的代谢物的获取方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取喀斯特经果林根际土壤加入无菌水中，震荡，放置至澄清，取上清液稀释后涂布至阿须贝氏无氮培养基上；

(2)挑取单菌落，平板画线纯化后得到类芽孢杆菌，随后在Luria-Bertani液体培养基中扩大培养。

5.根据权利要求4所述的获取方法，其特征在于：所述步骤(1)中，喀斯特经果林根际土壤与无菌水的用量比为1g：10-20mL；

和/或，所述步骤(1)中，震荡时间为2-4小时；

和/或，所述步骤(1)中，上清液稀释800-1200倍后涂布至阿须贝氏无氮培养基上。

6.根据权利要求4所述的获取方法，其特征在于：所述步骤(1)中，所述阿须贝氏无氮培养基成分组成及制备方法为：磷酸二氢钾0.2g，硫酸镁0.2g，氯化钠0.2g，碳酸钙5.0g，甘露醇10.0g，硫酸钙0.1g，琼脂18.0g，pH值6.8-7.0，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌20分钟；

和/或，所述步骤(2)中，所述Luria-Bertani液体培养基成分组成及制备方法为：酵母粉5g/L，胰蛋白胨10g/L，氯化钠10g/L，pH7.0，121℃灭菌20min。

7.根据权利要求1-3任一项所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将类芽孢杆菌接种于Luria-Bertani液体培养基中，培养至对数生长期，震荡培养，获得种子液；

(2)将步骤(1)培养好的种子液接种于Luria-Bertani液体培养基中，进行发酵，发酵结束后，所得培养液即为所述微生物菌剂。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，培养条件为：温度35-38℃、转速150-200rpm，培养时间12-16h；

和/或，所述步骤(1)中，培养至对数生长期时，菌量为1.0×10⁸～1.0×10⁹CFU/mL；

和/或，所述Luria-Bertani(LB)培养基成分组成及制备方法为：酵母粉5g/L，胰蛋白胨10g/L，氯化钠10g/L，pH7.0，121℃灭菌20min。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，种子液在Luria-Bertani液体培养基中的接种量为1-5％；

和/或，所述步骤(2)中，发酵条件为：初始pH 7.0，温度35-38℃，转速150-200rpm，发酵12-16h。

10.根据权利要求1-3任一项所述的微生物菌剂和/或根据权利要求7-9任一项所述的方法制备得到的微生物菌剂在作物培育上的应用。