[发明专利]一种HLA-A*0201限制性CMVpp65特异性T细胞受体及其应用

说明书

本发明提供了一种HLA‑A*0201限制性CMVpp65特异性T细胞受体及其应用。该T细胞受体包括α链和β链；该α链CDR3区的氨基酸序列为SEQ ID NO：8或对如SEQ ID NO：8所示氨基酸序列进行化学基团修饰并保留其功能的氨基酸序列，该β链CDR3区的氨基酸序列为SEQ ID NO：11或对如SEQ ID NO：11所示氨基酸序列进行化学基团修饰并保留其功能的氨基酸序列。本发明提供的HLA‑A*0201限制性CMVpp65特异性T细胞受体可以特异性识别CMVpp65来源的，提呈在表达HLA‑A*0201细胞的NLV表位，异位表达该T细胞受体的CD8⁺T淋巴细胞对孵育NLV的LCL021靶细胞具有较高的杀伤性，由于HLA‑A*0201表达的高频性，使得这种细胞可以应用于较多的人群，具有很高的药用价值。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种HLA-A*0201限制性CMVpp65特异性T细胞受体及其应用。

背景技术

人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus，HCMV)是一种在健康人群中具有50-100％感染率的疱疹病毒。HCMV在人出生后不久或幼儿时期就已经感染，在健全免疫系统的监视和控制下，极少引起明显的病症。但在造血干细胞由于预处理过程将淋巴细胞清除，或实体器官移植后受者长期使用ATG、环孢素A等药物抑制T细胞活性的情况下，体内的T淋巴细胞减少和失能，失去了对抗HCMV感染的能力，病毒在这种情况下得以激活、复制，引起一系列危及生命的严重疾病，尤其在实体器官移植后约50％的受者会感染HCMV。感染者中，约10-50％的患者会出现临床症状，主要表现为多个脏器的炎症，如肺炎、肝炎、肠炎、脑炎和肾炎等。在造血干细胞移植后，也会出现类似的情况，最常见的症状为HCMV引起的肺炎和肠炎，其中最常见的肺炎，导致的死亡率为30-60％。目前用于CMV感染的预防和治疗药物包括更昔洛韦等，但这些药物存在治疗效果差、骨髓抑制等不良反应，影响移植效果。

HCMV感染疾病根源于T细胞数量的减少和失能，输注可特异性识别和杀伤CMV感染细胞的淋巴细胞，即CMV-CTLs(CMV specific cytotoxic T lymphocytes)恢复患者对CMV的T细胞免疫反应，就可以有效治疗和预防这类疾病，这一设想已经在一系列临床研究中得到验证。但CMV-CTLs培养方法费时费力，效率低，而且由于HLA(人类白细胞分化抗原)限制性，这种细胞制品基本上只能自体应用，无法应对紧迫和复杂的临床需求。如果分离常见HLA限制性CMV抗原特异性T淋巴细胞，获取编码主要负责抗原识别的T细胞受体基因，并进一步将这些基因导入异体淋巴细胞中使之高效表达，就制造出一种与原CMV-CTLs具有相同抗原识别和杀伤功能的新淋巴细胞。这种细胞可以在培养后长期保存，并在需要时即时应用，拥有了和传统药物类似的货架产品特征，是解决这类细胞产品的最有希望的途径之一。HLA-A*0201是世界各种族人群中均高频表达的HLA等位基因。发现和筛选HLA-A*0201限制性HCMV抗原特异性T细胞受体(T-cell receptor，TCR)，获取其编码基因并转导异体淋巴细胞后，使这些细胞具有HLA-A*0201限制性模式下，识别和杀伤感染CMV的细胞。由于HLA-A*0201表达的高频性，使得这种方法可以应用于较多的人群，具有很高的应用价值。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供了一种HLA-A*0201限制性CMVpp65特异性T细胞受体及其应用。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种HLA-A*0201限制性CMVpp65特异性T细胞受体，包括α链和β链；该α链CDR3区的氨基酸序列为SEQ ID NO：8或对如SEQ ID NO：8所示氨基酸序列进行化学基团修饰并保留其功能的氨基酸序列，该β链CDR3区的氨基酸序列为SEQ ID NO：11或对如SEQ ID NO：11所示氨基酸序列进行化学基团修饰并保留其功能的氨基酸序列。