[发明专利]T细胞抗原受体、其多聚体复合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种T细胞抗原受体，其特征在于，所述的T细胞抗原受体特异性结合CMV pp65，所述的T细胞抗原受体包含α链的CDR1α-CDR3α和β链的CDR1β-CDR3β，其中，CDR1α的氨基酸序列包含SEQ ID NO：1或包含与SEQ ID NO：1所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR2α的氨基酸序列包含SEQ ID NO：2或包含与SEQ ID NO：2所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR3α的氨基酸序列包含SEQ ID NO：3-4中的任一种或包含与SEQ ID NO：3-4中任一种所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR1β的氨基酸序列包含SEQ ID NO：5-6中的任一种或包含与SEQ ID NO：5-6中任一种所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR2β的氨基酸序列包含SEQ ID NO：7-8中的任一种或包含与SEQ ID NO：7-8中任一种所示氨基酸序列具有至少80％同源性，CDR3β的氨基酸序列包含SEQ ID NO：9-10中的任一种或包含与SEQ ID NO：9-10中任一种所示氨基酸序列具有至少80％同源性；

优选的，所述的CDR1α-CDR3α及CDR1β-CDR3β包含下列任一组：

2.根据权利要求1所述的T细胞抗原受体，其特征在于，其β链的氨基酸序列包含SEQ IDNO：32-33中的任一种或包含与SEQ ID NO：32-33任一种所示氨基酸序列具有至少80％同源性，其α链的氨基酸序列包含SEQ ID NO：34-35中的任一种或包含与SEQ ID NO：34-35任一种所示氨基酸序列具有至少80％同源性；

优选的，其α链与β链的氨基酸直接连接或间接连接，优选为间接连接，更优选通过fp2A连接；

进一步优选的，所述的T细胞抗原受体的氨基酸序列包含SEQ ID NO：28或30中的任一种或包含与SEQ ID NO：28或30任一种所示氨基酸序列具有至少80％同源性。

3.一种编码权利要求1-2任一所述的T细胞抗原受体的核酸。

4.一种表达载体，其特征在于，所述的表达载体包含权利要求3所述的核酸。

5.一种宿主细胞或免疫细胞，其特征在于，所述的宿主细胞包含权利要求3所述的核酸或权利要求4所述的表达载体，所述的免疫细胞表达权利要求1-2任一所述的T细胞抗原受体，优选的，所述的免疫细胞选自T细胞或干细胞，进一步优选的，所述的免疫细胞分离自受试者的T细胞衍生。

6.一种重组T细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)从阳性T细胞克隆得到权利要求3所述的核酸；

2)分离、培养原代T细胞；

3)将步骤1)得到的核酸递送至步骤2)所述的原代T细胞中，获得表达权利要求1-2任一所述T细胞抗原受体的重组T细胞；

优选的，所述的制备方法还包括敲除细胞内源性TCR的步骤。

7.一种T细胞抗原受体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)从阳性T细胞克隆得到权利要求3所述的核酸；

(2)将步骤(1)得到的核酸连接至载体骨架，获得表达载体；

(3)将步骤(2)获得的表达载体转化至宿主细胞，然后诱导其表达；

(4)获得T细胞抗原受体。

8.一种多聚体复合物，其特征在于，所述多聚体复合物包含权利要求1-2任一所述的T细胞抗原受体。

9.根据权利要求8所述的多聚体复合物，其特征在于，所述多聚体复合物还包括单体，生物素分子，以及链霉亲和素分子或亲和素分子，其中，所述单体包括MHC分子α链胞外区和β2m链及抗原肽，所述单体与所述生物素分子偶联，所述生物素分子与所述链霉亲和素或亲和素分子结合；

优选的，所述的抗原肽包含SEQ ID NO：11；

优选的，所述的MHC分子为HLA-A*2402。