[发明专利]一种保持高存活的浪人鲹精子冷冻液及其制备方法

说明书

本发明提供一种保持高存活的浪人鲹精子冷冻液及其制备方法，每升精子冷冻液中含有以下重量的原料：氯化钙0.08～0.10g、氯化镁0.05～0.08g、氯化钾0.1～0.2g、氯化钠1～2g、乙二胺四乙酸二钠0.1～0.2g、氯化锌0.03～0.05g、二水合钼酸钠0.05～0.08g、硒脲酸0.1～0.2g、复合多糖0.3～0.5g，所述复合多糖由枸杞多糖、黄精多糖和淫羊藿多糖制得。本发明冷冻液显著提高了浪人鲹精子长时间的存活率以及活力。

技术领域

本发明涉及精子冷冻液技术领域，特别涉及一种保持高存活的浪人鲹精子冷冻液及其制备方法。

背景技术

浪人鲹，英文名：Giant trevally，拉丁学名：Caranx ignobilis(1775)。浪人鲹，属于鲹科鲹属的一种海水鱼类。鲹科中最大的食肉鱼种，能够跃出水面捕食海鸟。为鲹科鲹属的鱼类，俗名白面弄鱼。分布于印度洋、红海、东至日本、澳大利亚以及中国南海、台湾海峡等海域。浪人鲹体呈卵圆形，侧扁而高，随着成长，身体逐渐向后延长。头背部强度弯曲，头腹部则几乎呈直线。脂性眼睑普通发达，前部达眼之前缘，后部达瞳孔后缘，留下略呈半圆的缝隙。吻钝。体背蓝绿色，腹部银白色。各鳍淡色至淡黄色。鳃盖后缘不具任何黑斑，体侧亦无任何斑纹。长居深海浪人鲹的精子往往质量上佳，采集新鲜精液后，如不及时使用，而运输往往需要较长的时间，采用现有精子冷冻液保存后120h后，出现精子损耗大，活力明显下降，存活率低等问题。

发明内容

鉴于此，本发明提出一种保持高存活的浪人鲹精子冷冻液及其制备方法，解决上述技术问题。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种保持高存活的浪人鲹精子冷冻液，每升精子冷冻液中含有以下重量的原料：氯化钙0.08～0.10g、氯化镁0.05～0.08g、氯化钾0.1～0.2g、氯化钠1～2g、乙二胺四乙酸二钠0.1～0.2g、氯化锌0.03～0.05g、二水合钼酸钠0.05～0.08g、硒脲酸0.1～0.2g、复合多糖0.3～0.5g，所述复合多糖由枸杞多糖、黄精多糖和淫羊藿多糖制得。

进一步的，所述复合多糖中枸杞多糖、黄精多糖和淫羊藿多糖的质量比为1：1.2-1.5：0.5-0.8。优选地，所述复合多糖由枸杞多糖、黄精多糖和淫羊藿多糖按质量比1：1.3：0.7制得。

进一步的，每升精子冷冻液中含有以下重量的原料：氯化钙0.09g、氯化镁0.07g、氯化钾0.13g、氯化钠1.5g、乙二胺四乙酸二钠0.13g、氯化锌0.04g、二水合钼酸钠0.06g、硒脲酸0.15g和复合多糖0.4g。

本发明还提供一种保持高存活的浪人鲹精子冷冻液的制备方法，包括以下步骤：首先将枸杞多糖、黄精多糖和淫羊藿多糖加入水中，搅拌混合，然后加入乙二胺四乙酸二钠、二水合钼酸钠、硒脲酸，于超声震荡，最后再加入氯化钙、氯化镁、氯化钾、氯化钠、氯化锌，搅拌混合，灭菌，制得冷冻液。

进一步的，所述超声震荡的温度为5-10℃，震荡时间为15-20min。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明冷冻液采用枸杞多糖、黄精多糖和淫羊藿多糖复合多糖结合乙二胺四乙酸二钠、二水合钼酸钠和和硒脲酸等，科学配比，有效降低对精子损耗，更好保护精子结构，提高精子的质量，显著提高了浪人鲹精子长时间的存活率以及活力。使用本发明冷冻液保存120h后，浪人鲹精存活率可以保持在94％以上，精子平均直线运动速度为75um/s以上。其中，乙二胺四乙酸二钠、二水合钼酸钠和和硒脲酸不但可以提高冷冻液的抗冻性，还可以促进枸杞多糖、黄精多糖和淫羊藿多糖更好发挥互补作用，协同增效。

具体实施方式

为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。

本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。