[发明专利]一种lncRNA分子及其应用

说明书

本发明涉及一种lncRNA分子及其应用，属于分子生物医学技术领域。本发明提供了一种在AAV患者外周血高表达的lncRNA分子，名称为LINC0219。本发明通过RNA‑seq及临床大样本验证成功筛选出AAV患者外周血中高表达的lncRNA，其可作为AAV诊断或评估的分子标志物或靶点，应用于AAV的早期诊断、活动性评估或作为治疗靶点，并可用于进一步阐明AAV发病的分子机制、信号通路等，具有极大的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种lncRNA分子及其应用，属于分子生物医学技术领域。

背景技术

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性血管炎(AAV)是一组多系统受累的自身免疫性炎症性疾病，其特征是中小血管的坏死性血管炎。AAV包括三种不同的临床类型：肉芽肿性多血管炎(GPA)，显微镜下多血管炎(MPA)和嗜酸性肉芽肿性多血管炎(EGPA)。本病几乎可以累及任何一个系统器官，临床表现缺乏特异性，疾病进展迅速，如不能早期诊断、及时治疗，累及肺、肾、消化道等重要脏器时通常会引起脏器不可逆损伤甚至危及生命。且疾病反复复发活动导致了治疗的困难，如不能早期识别疾病活动、正确评估，会严重影响患者的预后。

伯明翰血管炎活动评分(BVAS)被广泛用于评估AAV的疾病活动性和严重程度，但因其条目众多，给临床医生带来了不便，极大限制了其临床应用。此外，一些血清学指标包括血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、补体3a(C3a)、C5a 和基质金属蛋白酶3(MMP-3)等也被用于评估疾病活动性，但是它们的特异性与灵敏性不高。虽然评估方式很多，但是评分系统种类繁多、每个量表包含的条目众多，不易操作、既不能监测炎症反应又不能提供治疗靶点。因此，寻找AAV 相关的分子标志物，进一步明确其发病机制，并开发可应用于临床早期诊断、活动性评估和治疗靶点的指标尤为重要。

长链非编码RNA(Long Noncoding RNA,lncRNA)是一类转录本长度超过200nt 的不编码蛋白的RNA分子。但是它们作为RNA分子可在多个层面如基因水平、转录水平及转录后水平参与蛋白编码基因的调控。LncRNA在先天及适应性免疫中的作用已被证实，且与自身免疫性疾病的诊断、疾病活动和预后密切相关。但是在AAV中的作用尚未见相关报道。

发明内容

本发明的目的是为解决如何获得AAV诊断和疾病活动性评估的标志物以及该标志物可为AAV提供治疗上的靶点的技术问题。

为达到解决上述问题的目的，本发明所采取的技术方案是提供一种lncRNA 分子，为一种在AAV患者外周血高表达的lncRNA分子，其核苷酸序列为SEQ ID No.1。

本发明提供一种核苷酸序列为SEQ ID No.1的lncRNA分子的检测方法，包括以下步骤：

步骤1：收集静脉血，分离外周血白细胞，提取总RNA；

步骤2：设计实时定量荧光PCR引物；

步骤3：进行qRT-PCR反应，检测lncRNA分子的表达；

优选地，上述步骤2中PCR引物设为SEQ ID No.2和SEQ ID No.3。

本发明提供一种用于制备辅助诊断或评估AAV的试剂盒，所述试剂盒包括用于扩增SEQ ID No.1的lncRNA分子的特异性引物、标准DNA模版和PCR反应液；采用上述lncRNA分子的检测方法。

本发明提供一种lncRNA分子在制备AAV诊断、评估或辅助治疗的试剂或试剂盒中的应用。

本发明提供一种用于检测lncRNA分子的试剂在制备AAV诊断、评估或辅助治疗试剂或试剂盒中的应用。

相比现有技术，本发明具有如下有益效果：