[发明专利]一种连续流动高效分离富集细胞的方法及装置

权利要求书

1.一种连续流动高效分离富集细胞的装置，其特征在于，包括：

第一腔体，第二腔体，第三腔体，第一分隔网和第二分隔网，所述第一腔体、第二腔体、第三腔体垂直于底部，垂直于底部方向的投影沿平行于底部方向依次排列，每个腔体的之间的投影不重叠；

所述第二腔体位于所述第一腔体和所述第三腔体之间，以用于转移所述第二腔体内富集的所述细胞或有形物质，转细胞或有形物质的同时，不需要拆卸和破坏腔体本身和腔体之间的分隔部件，同时第一腔体、第三腔体的外形、结构和相对位置不变；

所述第一腔体的底部高于所述第二腔体的收缩锥状下凹处顶部，以用于将采集的细胞和细胞保存液添加至第一腔体内，有利于第二腔体收集细胞或有形物；

所述第一分隔网位于所述第一腔体和所述第二腔体的侧壁的交界面，以用于流动态细胞从所述第一腔体通过第一分隔网流向第二腔体；

所述第二分隔网位于所述第二腔体和所述第三腔体的侧壁的交界面，以用于将微小杂质和所述细胞保存液过滤向所述第三腔体；

所述第一腔体的底部设置为斜面，所述斜面的最低端与所述第一分隔网所在面相交；

所述第二腔体的底部为收缩状锥形下凹面；

所述第一分隔网位于所述第一腔体的底部；

所述第一分隔网的顶部高于所述第二分隔网的顶部；

所述第三腔体的底部略高于第二腔体的底部，与第二腔体底部同一高程；所述第二分隔网的底部略高于第二腔体收缩锥状下凹处顶部和第三腔体的底部；

还包括自动化仪器设备的组合针，所述组合针用于向所述第一腔体添加保存液，从第三腔体吸除保存液及杂质，从第二腔体底部将已富集的目标细胞或目标有形物悬浮液转移，实现转移目标细胞或有形物的同时不需要拆卸腔体及对腔体外壁和三个腔体之间的分隔状态产生破坏作用，达到连续流动富集的效果。

2.如权利要求1所述的连续流动高效分离富集细胞的装置，其特征在于，所述第一分隔网的通过孔径大于所述第二分隔网的通过孔径，第一分隔网的孔径小于杂质直径，第二分隔网孔径小于目标细胞和有形物的直径。

3.如权利要求1所述的连续流动高效分离富集细胞的装置，其特征在于，所述连续流动高效分离富集细胞的装置的顶部安装有上盖和密封装置，所述上盖通过所述密封装置与所述连续流动高效分离富集细胞的装置本体连接，所述上盖和密封装置隔离第一腔体和第二腔体之间除网孔以外的流通路径，第二腔体和第三腔体之间除网孔以外的流通路径。

4.一种应用权利要求1-3任一项装置连续流动高效分离富集细胞的方法，其特征在于，包括步骤：

S1、将采集的细胞和细胞保存液添加至第一腔体内；

S2、在所述第一腔体内混匀所述细胞和所述细胞保存液，以获得分散的流动态细胞；

S3、所述流动态细胞从所述第一腔体通过第一分隔网流向第二腔体，以用于所述第一分隔网将体积大于所述细胞的杂质拦截在所述第一腔体内；

S4、所述流动态细胞从所述第二腔体通过第二分隔网流向第三腔体，以用于所述第二分隔网将微小杂质和所述细胞保存液过滤向所述第三腔体；

S5、吸除残留在所述第三腔体内的所述微小杂质和所述细胞保存液；

S6、重复步骤S1-S4多次，转移所述第二腔体内富集的所述细胞或有形物的悬浮液。

5.如权利要求4所述的连续流动高效分离富集细胞的方法，其特征在于，所述将采集的所述细胞和所述细胞保存液添加至所述第一腔体内的方法包括：

用一次性滴管注入所述细胞保存液或者用自动化设备的组合针注入所述细胞保存液；

所述吸除残留在所述第三腔体内的所述微小杂质和所述细胞保存液的方法包括：

用一次性滴管吸除第三腔体内的液体及杂质或者用自动化设备的组合针吸除第三腔体内的液体及杂质；

所述转移所述第二腔体内富集细胞或有形物的方法包括：用一次性滴管吸取或者用自动化设备的组合针吸取并转移第二腔体内的富集细胞或有形物；

所述第一腔体注入细胞保存液，吸除液第三腔体液体和杂质，转移第二腔体目标富集细胞或有形物的过程各自独立，不改变和破坏腔体间的相对位置和分隔状态，以保证连续的获得流动态细胞或有形物，连续的得到含有富集的细胞或有形物的悬浮液，连续的转移细胞及有形物同时不改变细胞及有形物的保存环境。

6.如权利要求4所述的连续流动高效分离富集细胞的方法，其特征在于，所述在第一腔体内混匀所述细胞和所述细胞保存液，以获得所述流动态细胞或有形物的方法包括：

将连续流动高效分离富集细胞装置置于震荡器上震荡或使用装置附属装置通过旋转抽吸搅拌，或者向所述第一腔体内鼓入空气搅拌，同时不影响第二腔体和第三腔体的分隔状态。