[发明专利]一种抑菌的牡丹花蕾提取物及其制备方法

说明书

公开了一种牡丹花蕾提取物的制备方法，包括：对牡丹花蕾干粉进行溶剂提取和超声波提取；然后使用DM130大孔吸附树脂和聚酰胺树脂纯化。此外，公开了上述制备方法得到的产物干粉。本发明牡丹花蕾提取物总黄酮纯度(含量)更高，达到70％以上。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域；涉及一种抑菌的牡丹花蕾提取物及其制备方法。

背景技术

随着我国大众生活水平的提高，绿色、自然、安全的健康理念逐渐为人们所接受。来自动植物等天然产物的研究开发逐渐受到国内外学术界和产业界的关注。我国拥有极其丰富的药用植物资源，而药用植物的提取物通常具有奇特的功能或疗效例如抗病毒、抗氧化、调节血脂、抑菌杀菌和增强免疫等。这其中，从药用植物中获取天然的抗菌物质逐渐成为热门的研究方向。所提取的抑菌物质可以广泛应用于各个领域，如化妆品、食品保鲜、作物防治等。因此，研究药用植物的天然植物抑菌成分，具有普遍的社会需求与令人期待的发展前景。

牡丹是毛茛目芍药科芍药属木本植物。牡丹全身都是宝。牡丹根皮，又称丹皮，具有较好的药用作用。牡丹籽油富含不饱和脂肪酸，具有极高的保健和营养价值。牡丹种荚含有植物多糖，对降血糖和提高人体免疫力具有一定的作用。牡丹花蕾富含多酚、黄酮类和花色苷物质，具有抑菌、杀菌和抗炎功效。

研究表明，牡丹花蕾中主要含有七种黄酮类物质，分别为山奈酚单糖苷、山奈酚二糖苷、芹黄素单糖苷、芹黄素二糖苷、木犀草素单糖苷、木樨草素二糖苷和木犀草素苹果酰葡萄苷。近年来的研究多涉及到具有抗菌能力的此类黄酮类物质的分离提取方法。

唐浩国等人使用乙醇溶液提取牡丹叶干粉中的总黄酮，经大孔吸附树脂HPD600和D101吸附并且使用70％的乙醇水溶液洗脱，旋转蒸发浓缩洗脱液，再经截留分子量1万道尔顿的超滤膜分离，从而将总黄酮类物质的纯度提高至40％。牡丹叶总黄酮对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和沙门氏菌等3种细菌均有一定的抑制作用,其中对沙门氏菌的抑制作用最为显著。然而，上述方法所得到的总黄酮纯度不能令人满意，尤其是大孔吸附树脂纯化后得到的总黄酮针对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑菌效果甚至不如牡丹叶总黄酮提取液。

范敬宜等人首先以不同制膜液配比制备不同孔径的超滤膜，用于牡丹黄酮粗提液的预过滤；然后利用两级不同孔径的纳滤膜进行分级过滤－浓缩牡丹黄酮提取液，以实现牡丹黄酮的精制。最终经过超滤-纳滤组合工艺提纯后所得黄酮纯度从15.6％提升至79％。牡丹黄酮对酪氨酸酶具有明显的抑制作用，其单酚酶为4.8mg/mL，二酚酶为13.8mg/mL，与高效美白剂苯乙基间苯二酚抑制效果比较接近。然而，该超滤-纳滤组合工艺不仅需要两种较为昂贵的卷式纳滤膜组件NWCO-1000和NWCO-300，同时超滤膜也是通过自制不同铸膜液配比调控得到的PES超滤膜；工艺和装置较为复杂。此外，无论是超滤膜还是纳滤膜，使用几次都会出现大分子杂质堆积在膜表面上，从而降低膜通量和膜性能。

因此，迫切需要针对上述技术缺陷，提供一种总黄酮纯度更高的抑菌的牡丹花蕾提取物及其制备方法。

发明内容

本发明目的是提供一种总黄酮纯度更高的抑菌的牡丹花蕾提取物及其制备方法。

为了实现上述目的，一方面，本发明所采取的技术方案如下：

一种牡丹花蕾提取物的制备方法，包括如下步骤：

(1)对牡丹花蕾干粉先进行溶剂提取，然后在保温条件下进行超声波提取，过滤得到滤液；滤液离心取上清液，冷冻干燥得到粗提物干粉；

(2)将粗提物干粉溶解于50-70％乙醇溶液，得到上样液；将上样液在预处理的DM130大孔吸附树脂上进行上样；然后以50-70％乙醇溶液作为洗脱剂进行洗脱；

(3)收集洗脱液，调节浓缩液中总黄酮含量为1-7mg/mL，得到聚酰胺树脂的上样液；将上样液在预处理的聚酰胺树脂上进行上样；然后以50-70％乙醇溶液作为洗脱剂进行洗脱；收集洗脱液，浓缩蒸发；最后冷冻干燥得到产物干粉。