[发明专利]一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法

权利要求书

1.一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、预处理：选取动物的新鲜肿瘤组织，通过注射法或灌注法将固定液渗透至组织的内部，选择脱水剂置换固定后的组织中的水分，并使用透明剂进行透明处理；

S2、浸蜡、包埋：石蜡浸入组织中以取代透明剂；将浸蜡的组织置于融化的固体石蜡中，石蜡凝固后，组织被包埋形成蜡块；

S3、切片：修整蜡块后，将蜡块固定，并使用竖直切片刀或环形切片刀对蜡块进行切片，以同心圆的方式切片，或沿蜡块的外缘表面的任一点以螺旋轨迹的方式切片；

S4、铺片：将S3中切片分割成不同样本，样本编号后，将样本平铺于40℃～45℃的水面，借水的张力和水的温度，将略皱的样本自然展平；

S5、贴片、烤片：将样本按照编号依次贴片于载玻片，并烤片去除余水；

S6、染色、封片：使用苏木素-伊红染色法对样本进行染色，吹干后封片。

2.根据权利要求1所述的一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法，其特征在于：在所述S3中，以螺旋轨迹的方式切片，蜡块和切片刀的安装方式为：钎管沿蜡块的中轴线穿过，钎管两端均连接旋转台，并将蜡块上下固定；沿蜡块的外缘表面的任一点的切线位置偏移4～6μm竖直安装切片刀并固定。

3.根据权利要求2所述的一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法，其特征在于：以螺旋轨迹的方式切片时，旋转台带动蜡块旋转，切片刀沿偏移4～6μm的切线方向以一定位移速度移动，使得蜡块形成螺旋状的切片轨迹。

4.根据权利要求3所述的一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法，其特征在于：所述旋转台的旋转速率与所述切片刀的位移速度相匹配，保证石蜡的切片厚度为4～6μm。

5.根据权利要求1所述的一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法，其特征在于：在所述S3中，以同心圆的方式切片，蜡块和切片刀的安装方式为：将蜡块置于大小相匹配的切割凹槽中并通过金属箍固定，环形切片刀置于所述切割凹槽正上方。

6.根据权利要求5所述的一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法，其特征在于：所述环形切片刀为若干大小不一的同心圆式切片刀组合，相邻所述切片刀之间的间隙相等，间隙为4～6μm。

7.根据权利要求5所述的一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法，其特征在于：以同心圆的方式切片时，所述环形切片刀与所述蜡块完全对准后，沿竖直方向切片蜡块。

8.根据权利要求1所述的一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法，其特征在于：蜡块切片展开后，将样本进刀处和出刀处两端的组织切除，以保证所有组织切片样本的平整度保持一致。

9.根据权利要求1所述的一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法，其特征在于：在所述S1中，所述脱水剂为不同浓度的乙醇溶液，脱水处理分别进行80%、90%、95%、100%乙醇浓度的梯度脱水，每个梯度的脱水处理时间为2.5-3h，脱水处理通过人工完成或脱水机自控完成。

10.根据权利要求1所述的一种肿瘤组织连续病理切片的制作方法，其特征在于：在所述S5后，还进行脱蜡处理，选择二甲苯多次处理蜡块后，再加入不同浓度的乙醇，并通过流水冲洗。