[发明专利]用cpSSR分子标记法对山药种质资源真实性进行鉴别的方法

说明书

本发明公开了一种用cpSSR分子标记法对山药种质资源真实性进行鉴别的方法。本发明公开的一种用于辅助鉴定山药种质资源真实性的引物组，由SY69、SY104、SY108、SY158、SY161、SY196、SY216、SY280、SY302、SY326中的至少两种引物对组成。本发明SY161，SY326构建64份供试种质资源的指纹图谱，使得山药种质资源真实性的鉴定简便、快捷、重复性和稳定性好，为cpSSR分子标记技术更广泛地用于山药种质资源真实性鉴定打下良好的基础。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体的说，本发明涉及用cpSSR分子标记法对山药种质资源真实性进行鉴别的方法。

背景技术

山药(DioscoreaoppositeacThunb)，是百合目(Liliales)薯蓣科(Dioscoreaceace)薯蓣属(Dioscorea)一年生或多年生缠绕性藤本植物，药食两用。我国山药种质资源在长期种植过程中，由于生态环境的变化、人工选择、历史变迁，品种资源丰富，如铁棍山药，佛手山药，日本小叶山药，嘉祥细长毛山药等。山药种质资源复杂多样，地区间引种，真假山药无法有效鉴定，分类鉴定难度大。山药也是临床配方常用中药，它的主要功能是：益气养阴，补脾肺肾，山药的混伪品大量存现于市场，而且混伪品加工作伪手段越来越高明。

山药的真实性和纯度是衡量山药质量的重要指标，直接影响山药的产量和品质。生产上如何快速、准确鉴定山药真实性是一个突出的问题。传统的形态鉴定法依赖于品种表型差异，而形态性状的表现受环境影响较大，稳定性差，误鉴率较高。

分子标记技术具有丰富的多态性和环境稳定性，且操作简便，已开始广泛应用于作物品种鉴定与纯度检测中。叶绿体微卫星(chloroplastSSR,cpSSR)，是一种新型高效的微卫星子标记技术结合了SSR和cpDNA的优点，重复性好，多态性高，显性遗传，分布广泛且进化缓慢、结构简单，分子量小，单亲保守遗传，cpSSR标记已被广泛应用于遗传多样性研究。在山药中，应用cpSSR分子标记分析山药种质资源遗传多样性已有报道，但应用cpSSR分子标记技术进行山药品种真实性鉴定的方法尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种简便、快捷、重复性和稳定性好的对山药种质资源真实性进行鉴别的方法。

本发明提供一种获取DNA山药指纹图的引物组合物，所述引物组合物由引物对SY161和引物对SY326，其中，引物对SY161由SEQIDNo.1和SEQIDNo.2所示的两条单链DNA组成；引物对SY326由SEQIDNo.3和SEQIDNo.4所示的两条单链DNA组成

本发明还提供一种获取山药DNA指纹图谱的成套引物对，由述的引物组合物和下述引物对中的至少一种组成：

A1)由SEQIDNo.5和SEQIDNo.6所示的两条单链DNA组成的名称为SY69的引物对；

A2)由SEQIDNo.7和SEQIDNo.8所示的两条单链DNA组成的名称为SY104的引物对；

A3)由SEQIDNo.9和SEQIDNo.10所示的两条单链DNA组成的名称为SY108的引物对；

A4)由SEQIDNo.11和SEQIDNo.12所示的两条单链DNA组成的名称为SY158的引物对；

A5)由SEQIDNo.13和SEQIDNo.14所示的两条单链DNA组成的名称为SY196的引物对；

A6)由SEQIDNo.15和SEQIDNo.16所示的两条单链DNA组成的名称为SY216的引物对；

A7)由SEQIDNo.17和SEQIDNo.18所示的两条单链DNA组成的名称为SY280的引物对；

A8)由SEQIDNo.19和SEQIDNo.20所示的两条单链DNA组成的名称为SY302的引物对。