[发明专利]可可提取物在制备抵抗衰老及抑制肿瘤的药物中的应用

权利要求书

1.可可提取物的应用，用于与米托蒽醌或博莱霉素或阿霉素联合制备特异性靶向清除肿瘤微环境中衰老细胞及抑制肿瘤的组合物；所述可可提取物的制备方法为：(1)混合酶催化酶解，所述的酶为纤维素酶、果胶酶和蛋白酶，可可豆粉碎后混悬在水中，加入混合酶制剂进行2～10小时充分酶解，过滤后得到酶解物；(2)有机溶剂萃取：将所述酶解物与乙醇溶液混合后加热回流、提取；(3)对提取物经过基于膜分离技术的超滤浓缩纯化，再经低温真空浓缩，得到可可提取物终产品；所述肿瘤为前列腺癌。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，米托蒽醌与可可提取物的重量比例为1:40～60。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，博莱霉素终浓度45～55ug/mL，且可可提取物终浓度95～105uM。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，博莱霉素终浓度45～55ug/mL，且可可提取物终浓度200～1200uM。

5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，阿霉素与可可提取物的重量比例为1:8～12。

6.一种用于特异性靶向清除肿瘤微环境中衰老细胞以及抑制肿瘤的药物组合物或药盒，包括：可可提取物，以及化疗药物；其中所述的化疗药物为米托蒽醌或博莱霉素或阿霉素；所述可可提取物的制备方法为：(1)混合酶催化酶解，所述的酶为纤维素酶、果胶酶和蛋白酶，可可豆粉碎后混悬在水中，加入混合酶制剂进行2～10小时充分酶解，过滤后得到酶解物；(2)有机溶剂萃取：将所述酶解物与乙醇溶液混合后加热回流、提取；(3)对提取物经过基于膜分离技术的超滤浓 缩纯化，再经低温真空浓缩，得到可可提取物终产品；所述肿瘤为前列腺癌。

7.如权利要求6所述的药物组合物或药盒，其特征在于，米托蒽醌与可可提取物的重量比例为1:40～60。

8.如权利要求6所述的药物组合物或药盒，其特征在于，博莱霉素终浓度45～55ug/mL，且可可提取物终浓度95～105uM。

9.如权利要求6所述的药物组合物或药盒，其特征在于，博莱霉素终浓度45～55ug/mL，且可可提取物终浓度200～1200uM。

10. 如权利要求6所述的药物组合物或药盒，其特征在于，阿霉素与可可提取物的重量比例为1 : 8～12。

11. 一种筛选促进可可提取物清除肿瘤微环境中衰老细胞或抑制肿瘤的潜在物质的方法，所述可可提取物的制备方法包括两步提取法：(1)混合酶催化酶解，所述的酶为纤维素酶、果胶酶和蛋白酶，可可豆粉碎后混悬在水中，加入混合酶制剂进行2～10小时充分酶解，过滤后得到酶解物；(2)有机溶剂萃取：将所述酶解物与乙醇溶液混合后加热回流、提取；(3)对提取物经过基于膜分离技术的超滤浓 缩纯化，再经低温真空浓缩，得到可可提取物终产品；所述方法包括：

(1)提供一肿瘤微环境体系，该体系包括前列腺癌肿瘤细胞和基质细胞；

(2)利用化疗药物处理(1)的体系、诱发肿瘤微环境发生衰老相关分泌表型，且在诱发肿瘤微环境发生衰老相关分泌表型之前、之时或之后，以可可提取物进行处理，所述的化疗药物为米托蒽醌或博莱霉素或阿霉素；

(3)将候选物质加入到(2)的体系中，观测其对肿瘤微环境体系的作用，若所述候选物质在统计学上能够促进可可提取物清除肿瘤微环境中衰老细胞，则该候选物质是可与可可提取物联用于清除肿瘤微环境中衰老细胞或抑制肿瘤的潜在物质。