[发明专利]一种猫冠状病毒一体化核酸检测卡盒

说明书

本发明公开了一种猫冠状病毒一体化核酸检测卡盒，包括盒体，盒体内从上至下依次设有裂解腔、第一清洗腔和第二清洗腔，其中裂解腔连通至盒盖，第二清洗腔连通至盒体外侧底部设置的反应腔；所述裂解腔、第一清洗腔、第二清洗腔和反应腔的两两相连区间分别设置有柱塞孔方向垂直于连接方向的柱塞，柱塞的柱塞孔内设有疏水性液态封闭材料；所述反应腔内设有扩增反应液，扩增反应液包括猫冠状病毒ORF基因的引物探针混合液；所述反应腔中设有可熔性材料层，可溶性材料层内包埋有DNA聚合酶溶液。本发明可以在相对较低成本的情况下，快速一体化地对猫冠状病毒进行PCR扩增及检测，解决现行技术重复性差、检测方法耗时、操作复杂等问题。

技术领域

本发明涉及一种猫冠状病毒一体化核酸检测卡盒，属于医学检测技术领域。

背景技术

猫冠状病毒感染症是由猫冠状病毒(Feline Coronavirus)引起的一种传染病，已知FCoV有两种生物型：猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)和猫肠道冠状病毒(FECV)。虽然FIPV和FECV都可以引起病毒血症，但是，只有FIPV可以在巨噬细中复制并引起猫传染性腹膜炎(FelineInfectiousPeritonitis，FIP)。FIP是由猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)感染引起的猫科动物一种慢性进行性致死性传染病，以腹膜炎、大量腹水积聚为主要特征，FIP是具有多种临床表现的一种疾病。

目前猫冠状病毒的检测方法主要有以下几种：

(1)电镜检测：通过电镜观察可从粪便中检测到病毒(FCoV)。

(2)染色法：对组织切片进行染色镜检是诊断FIP较好的一种方法，HE染色可较好地定位巨噬细胞，中性粒细胞，淋巴细胞和浆细胞的局部炎症，但灵敏度较低，设备要求较高，且操作麻烦。

(3)抗体检测：病毒感染后会使体内出现特异性免疫反应，产生特异性的抗体，可通过酶联免疫(ELISA)或胶体金等方法检出。该方法设备简单，需要的试剂较少，操作简捷方便，可以在数小时内得到结果。但因IgM、IgG抗体产生的窗口期及交叉反应，所以此法适用于初步筛查。

(4)核酸分子检测法：能较为敏感地检测鼻咽拭子、胸腹水及粪便样品中的FCoV。样品需要仔细保存处理，以防环境中到处存在的RNA降解酶。

电镜检测对仪器设备要求太高，普通的宠物检测单位极少配备。染色法灵敏度不高且需要丰富的技术经验来进行结果的判定。故目前猫冠状病毒的检测主要集中在抗体和核酸检测。抗体检测操作便捷、检测迅速，可作为核酸诊断的补充手段，但由于抗体检测“假阳性”，“假阴性”和灵敏度等局限性，不适合用于病原确诊，也不适用于在低流行地区的流行病学调查。核酸检测目前是猫病毒检测的“金标准”，具有早期诊断、灵敏度和特异性高等特点。

常规的核酸检测采用实时荧光定量PCR方法，操作技能要求严格，需经专业培训。猫冠状样本核酸提取较为麻烦，根据核酸提取的方式的不同一般耗时30分钟至120分钟不等、核酸扩增时间在2小时之内，而加上试剂准备、加样、结果分析等人工操作的时间，一般一次实验需要耗时4-5小时，绝大多数宠物医院实验室并不具备上述专业人员和设备设施，只会将样本运送至有设备的宠物医院，而这种情况下，患猫需等待的时间较长，不能即刻得到有效的治疗。所以，分子POCT进行的核酸检测得到迫切需要。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种猫冠状病毒一体化核酸检测卡盒。它可以在相对较低成本的情况下，快速一体化地对猫冠状病毒进行PCR扩增及检测，解决现行技术重复性差、检测方法耗时、操作复杂等问题。