[发明专利]一种用于登革、寨卡和基孔肯雅病毒的三联检测卡盒有效
| 申请号： | 202110155965.8 | 申请日： | 2021-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN112760419B | 公开（公告）日： | 2022-09-27 |
| 发明（设计）人： | 赵怀;封帆;华灿忠;查丽虹 | 申请（专利权）人： | 杭州遂曾生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州新源专利事务所(普通合伙) 33234 | 代理人： | 郑双根 |
| 地址： | 311121 浙江省杭州市余杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 基孔肯雅 病毒 三联 检测 | ||
1.一种用于登革、寨卡和基孔肯雅病毒的三联检测卡盒，其特征在于：包括顶部带盒盖(2)的盒体(1)，盒体(1)内从上至下依次设有带裂解液的裂解腔(3)、带第一清洗液的第一清洗腔(4)和带第二清洗液的第二清洗腔(5)，其中裂解腔(3)连通至盒盖(2)，第二清洗腔(5)连通至盒体(1)外侧底部设置的反应腔(6)；所述裂解腔(3)、第一清洗腔(4)、第二清洗腔(5)和反应腔(6)的两两相连区间分别设置有柱塞孔方向垂直于连接方向的柱塞(7)，柱塞(7)的柱塞孔内设有疏水性液态封闭材料；所述反应腔(6)内设有扩增反应液，扩增反应液包括RNA-directTM Realtime PCR Master Mix和登革热病毒、寨卡病毒及基孔肯雅病毒的引物探针混合液；所述裂解腔(3)内设有能穿过柱塞(7)的柱塞孔的磁珠(8)；
所述登革病毒、寨卡病毒及基孔肯雅病毒的引物探针混合液包括：登革热病毒上游引物和登革热病毒下游引物，寨卡病毒上游引物和寨卡病毒下游引物，基孔肯雅病毒上游引物和基孔肯雅病毒下游引物，内标上游引物和内标下游引物，以及登革病毒探针、寨卡病毒探针、基孔肯雅病毒探针和内标探针，具体为
所述柱塞(7)的柱塞孔直径为3-5mm，磁珠(8)的直径为0.1-100μm，疏水性液态封闭材料的密度为0.1-1.5g/cm3，粘度为2000-200000CSt。
2.根据权利要求1所述的用于登革、寨卡和基孔肯雅病毒的三联检测卡盒，其特征在于：所述反应腔(6)中的反应液的部分反应组分包埋在可熔性材料内。
3.根据权利要求2所述的用于登革、寨卡和基孔肯雅病毒的三联检测卡盒，其特征在于：扩增反应所需的锰离子液包埋在可熔性材料内。
4.根据权利要求1所述的用于登革、寨卡和基孔肯雅病毒的三联检测卡盒，其特征在于：所述RNA-directTM Realtime PCR Master Mix和引物探针混合液的体积比为3～4:2～3。
5.根据权利要求1所述的用于登革、寨卡和基孔肯雅病毒的三联检测卡盒，其特征在于：所述裂解液包含1-1000mM乙酸-乙酸钠、0.1-10％聚乙二醇、0.1-10M GTC、0.1-10％曲拉通X-100和1-5％月桂基硫酸钠，pH值为2.0-7.0。
6.根据权利要求1所述的用于登革、寨卡和基孔肯雅病毒的三联检测卡盒，其特征在于，所述第一清洗液包含1-500mM盐酸缓冲液、10-500mM KCl和0.1-10％聚乙二醇，pH值为5.0-8.0；第二清洗液包含1-500mM盐酸缓冲液、10-500mM KCl、0.1-10％聚乙二醇和0.1-5％非蛋白封闭剂，pH 值为5.0-8.0。
7.根据权利要求1所述的用于登革、寨卡和基孔肯雅病毒的三联检测卡盒，其特征在于：所述疏水性液态封闭材料为硅油。
8.根据权利要求1所述的用于登革、寨卡和基孔肯雅病毒的三联检测卡盒，其特征在于：所述反应腔(6)为置于盒体(1)外侧的锥管，锥管一侧设有平面。
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