[发明专利]益母草注射液的HPLC指纹图谱及其建立方法

说明书

本发明提供了一种益母草注射液的HPLC指纹图谱及其建立方法。该益母草注射液的HPLC指纹图谱包含4个共有特征峰，按照保留时间升序排列，各共有特征峰分别是：1号峰：保留时间3.4min；2号峰：保留时间11.3min；3号峰：保留时间12.9min；4号峰：保留时间14.7min。本发明首次建立了包括上述4个共有特征峰的益母草注射液HPLC指纹图谱，利用该HPLC指纹图谱能够对益母草注射液中的胡芦巴碱和盐酸水苏碱等物质进行有效的质量控制，使制剂更加稳定、可控。本发明建立该益母草注射液的HPLC指纹图谱的方法耐用性、精密度和重复性良好，本发明为益母草注射液提供了一种新的质量控制方法。

技术领域

本发明属于注射制剂质量控制领域，具体涉及益母草注射液的HPLC指纹图谱及其建立方法。

背景技术

益母草注射液是一种治疗妇产科疾病的临床常用中药。研究表明，孕妇流产后采用益母草注射液能减少产后出血，因为益母草注射液作为收缩子宫药，它具有十分强烈的兴奋子宫平滑肌的作用，用于流产患者有助于恢复再生其子宫内膜的创伤，减少患者阴道的出血量和缩短出血的时间；此外，益母草注射液还具有治疗痛经的作用，能治疗月经期偏头痛。

益母草注射液的主要有效成分为总生物碱，根据物质基础研究结果表明，益母草注射液中总生物碱主要由盐酸水苏碱和氯化胆碱组成，其中盐酸水苏碱约占生物碱总量的90％。根据《卫生部药品标准中药成方制剂第二十册》，益母草注射液每支(1mL)含总生物碱以盐酸水苏碱(C₇H₁₃NO₂·HCl)计算，应为18～22mg。

由于益母草注射液中所含成分复杂，使益母草注射液的稳定性和可控性较差，不同药材、成品批次不同，质量也有较大的浮动。除总生物碱碱外，益母草注射液还包含很多其他已知或未知的成分。因此，单一成分含量测定不足以说明益母草注射液的质量，亦缺乏专属性。

中药指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或中成药经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材或中成药药物特性的共有峰的图谱。根据质量控制目的，可分为指纹图谱和特征图谱。指纹图谱是基于图谱的整体信息，用于中药质量的整体评价，确保其内在质量的均一和稳定。指纹图谱从中医整体观念和中药药效来自多种化学物质综合作用的观点出发，能够建立比较客观、整体和多指标的综合评价体系，并通过图谱的整体特征，能够比较全面地反映出中药所含化学成分的种类与数量，是一种综合的、可量化的质量控制手段。与测定单一组分相比，它的优势在于能够提供更丰富、有效的质和量的信息，因此指纹图谱技术可以更客观、科学、合理地进行中药质量控制。中药指纹图谱能较为宏观和综合地反映中药的内在质量已被国内外研究者所认可。

因此，建立能够准确、全面的反应益母草注射液的化学成分的指纹图谱具有重要的意义。

杨超等(《益母草注射液指纹图谱的研究》)公开了一种建立益母草注射液指纹图谱的方法，该方法利用高效液相色谱-蒸发光散射检测法柱建立了益母草注射液指纹图谱，确定了该指纹图谱中的色谱峰有Cl^-、5-羟甲基-2糠酸、水苏碱、Na⁺、K⁺、胆碱。对31批益母草注射液进行指纹图谱检测，并采用中药指纹图谱相似度评价系统对各批样品指纹图谱进行相似度计算，相似度均大于0.90。

但是，随着对益母草注射液化学成分研究的深入，发现益母草注射液中存在生物碱类成分胡芦巴碱，而现有的益母草注射液HPLC指纹图谱均不能对益母草注射液中的胡芦巴碱进行有效的控制。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的益母草注射液的HPLC指纹图谱及其建立方法。该HPLC指纹图谱中的共有特征峰包括2个未知峰、盐酸水苏碱峰和胡芦巴碱峰，利用该HPLC指纹图谱能够对益母草注射液中的胡芦巴碱和盐酸水苏碱等物质进行有效的质量控制，使制剂更加稳定、可控。

本发明提供了一种益母草注射液的HPLC指纹图谱的建立方法，所述方法利用高效液相色谱法，具体包括以下步骤：