[发明专利]靶向CCL19/CCR7的乙型肝炎免疫治疗剂及其用途

说明书

本发明公开了靶向CCL19/CCR7的乙型肝炎免疫治疗剂及其用途，属于生物医药技术领域。本发明提供了具有免疫增强作用的CCL19蛋白及敲减其受体CCR7表达的调节剂AAV‑shRNA‑CCR7(shCCR7)在促进提升CD8+T细胞的比例及HBV抗原特异性T细胞活化及凋亡，加速HBV清除方面的应用。可用于加速HBV慢性感染的哺乳动物体内HBV的清除，对制备HBV预防性药物或者治疗性疫苗提供了理论基础。

技术领域

本发明涉及靶向CCL19/CCR7的乙型肝炎免疫治疗剂及其用途，属于生物医药技术领域，具体涉及免疫调节剂及其用途。

背景技术

全世界大约有2.5亿人长期感染乙型肝炎病毒(HBV)，极有可能发展为肝脂肪变性，肝硬化，终末期肝衰竭或肝细胞癌^(1,2)。当前批准的治疗策略，包括干扰素-α(IFN-α)，核苷和核苷酸类似物，在维持长期HBV“根除”方面仅提供有限的功效^(1,3,4)，不良事件的发生导致治疗终止或依从性差⁽⁵⁾。在初发性HBV感染中，病毒在大约90％的成年人中被完全根除，其余个体发展为病毒持久性和疾病进展。对乙肝病毒感染的免疫防御是复杂的，其机制已引起相当大的关注，这可能是对抗慢性乙型肝炎(CHB)的一种有希望的方法。HBV反应CD8+T细胞反应在感染开始时在病毒清除中起着关键作用，而这些反应在慢性感染(称为CD8+T细胞衰竭)期间后期变得相当弱^(2,6,7)。

在我们之前关于先天免疫的研究中，诸如样受体(Toll Like Receptor，TLR)等因子通过启动细胞内信号通路来产生干扰素(IFN)和其他细胞因子，从而被确定为HBV去除的第一条防线，从而诱导HBV反应的免疫反应⁽⁸⁾。趋化因子也认为是先天免疫和适应性免疫之间的重要环节，可以激活先天免疫反应^(9,10)。

趋化因子19(CCL19)是一种维持免疫平衡的药物，它协调CCR7表达的炎症性T淋巴细胞和树突细胞的招募和沿化学梯度的转运^(10,11)，也参与T细胞免疫反应和抗肿瘤免疫⁽¹²⁾。因此，CCL19和受体CCR7能够参与调节免疫反应，在HBV感染的过程中，HBV病毒的HBx蛋白通过模拟自噬受体分子参与免疫逃逸反应，而没有发生真正意义上的病毒感染细胞的凋亡及清除。HBx蛋白也会作用于CCL19和受体CCR7轴的下游信号而降低信号蛋白的表达，导致在急性感染阶段的抗病毒免疫反应降低(抑制感染的细胞凋亡)，最终导致慢性HBV感染⁽¹³⁾；相反，CCR7下游分子的信号被抑制会促发细胞凋亡，而清除病毒。因此，在病毒感染的过程中，减少CCR7分子的表达，也可能成为清除病毒感染的一个手段，但与CCL19免疫调节剂的调节机制是不同的。

肝脏是免疫耐受的器官，肝脏的实质细胞及非实质细胞有抑制免疫细胞活化的作用，如果有细胞因子可以打破这种免疫耐受，将有助于预防HBV等肝脏病原体的感染或加速感染病原体的清除。细胞因子作为免疫调节剂在抗病毒治疗中是广泛使用的，比如IFN-α在抗HBV治疗及抗新型冠状病毒治疗中都在《治疗指南》中被推荐⁽¹⁶⁾，趋化因子CCL19是人体内正常存在的一种特殊的细胞因子，常规了解到的功能是它能够促使含有其受体CCR7分子的淋巴细胞定向迁移，增强免疫反应，也可以作为分子佐剂或免疫增强剂，增强抗艾滋病毒HIV-1及2型疱疹病毒HSV-2的抗病毒免疫^(14,15)，但其在HBV免疫清除中的作用还尚未揭晓。

参考文献：