[发明专利]一种利用秸秆资源制备微生物油脂的方法

权利要求书

1.一种利用秸秆资源制备微生物油脂的方法，其特征在于，所述方法包括下述步骤：

步骤S1、预处理秸秆；

步骤S2、取一定量预处理秸秆置于酶解反应器中并加入纤维素酶，调整初始固液比启动酶水解，将纤维素酶液均匀地喷洒于预处理的秸秆中并充分混合得到含酶秸秆，然后采用流加补料的方式，以一定速率持续地将含酶秸秆补加至酶解反应器中，至固液比达到目标值，酶水解一段时间后结束；

步骤S3、酶水解结束后进行固液分离，得到高浓度糖液和酶解残渣，将酶解残渣进行两次定量水洗涤，具体的，第一次定量水洗涤固液分离收集到的洗涤水为中浓度糖液，收集到的酶解残渣进行第二次定量水洗涤，固液分离收集到低浓度糖液和富含木质素残渣；高浓度糖液的糖浓度大于300g/L，中浓度糖液的糖浓度为50～100g/L，低浓度糖液的糖浓度为15～25g/L；

步骤S4、取低浓度糖液添加适量营养物质得到种子培养基，挑取一环产油酵母接种于种子培养基中培养，得到种子液；取中浓度糖液添加适量营养物质得到发酵培养基，将所述种子液接种至发酵培养基中培养，当还原糖浓度低于10g/L时向其中补入所述高浓度糖液进行补料批式发酵；

步骤S5、发酵结束后固液分离，菌体用于提取微生物油脂，调整发酵上清液的糖浓度至5～15g/L，添加适量营养物质后作为产酶培养基，接种产酶真菌培养，收获的纤维素酶用于步骤S1的秸秆高固液比酶水解，发酵上清液中残留有聚合度2的可溶性纤维寡糖和木寡糖，作为真菌纤维素酶生产的诱导剂。

2.如权利要求1所述利用秸秆资源制备微生物油脂的方法，其特征在于，步骤S2中，所述初始固液比为5～10％w/v，含酶秸秆的补料速率为5～6.5g/L/h，所述固液比的目标值为50％w/v，酶水解96～144h后结束。

3.如权利要求1所述利用秸秆资源制备微生物油脂的方法，其特征在于，步骤S2中，纤维素酶液均匀地喷洒于预处理秸秆的酶载量为5-25FPU/g秸秆。

4.如权利要求1所述利用秸秆资源制备微生物油脂的方法，其特征在于，步骤S4中，所述产油酵母为可以直接利用葡萄糖、木糖及可溶性寡糖的产油酵母。

5.如权利要求1所述利用秸秆资源制备微生物油脂的方法，其特征在于，步骤S1中，所述秸秆为玉米秸秆、小麦秸秆、稻草、棉花秸秆或油菜秸秆。