[发明专利]一株跨属烈性噬菌体、制备工艺及其在防治猪副伤寒和鸡白痢的应用

说明书

本发明提供一株跨属烈性噬菌体，所述噬菌体，保藏编号为CCTCC NO：M 2020838；本发明首次分离出一株跨属感染鸡白痢沙门菌和猪霍乱沙门菌噬菌体，与单一裂解性沙门氏菌噬菌体相比，大大拓宽了其杀菌范围，对猪霍乱沙门菌强毒株C78‑2、弱毒疫苗株C500、鸡白痢沙门菌C79‑13、S06004、RKS5078、CDC1983‑67、均具有良好的裂解能力。本发明所述噬菌体具有杀菌速度快、产量高的特点。同时，还可与随水饮用，消除动物胃肠道沙门氏菌，用于防治猪副伤寒和鸡白痢，其使用方便。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株跨属烈性噬菌体的制备及其与枯草芽孢杆菌联合在防治猪副伤寒和鸡白痢的应用。

背景技术

沙门氏菌（salmonella）是公共卫生学上有重要意义的人畜共患病原菌之一。由沙门氏菌引起的食物中毒常居首位。不同的血清型的沙门氏菌可引起鸡白痢、鸡伤寒、猪副伤寒及动物流产等多种疾病，部分血清型沙门氏菌亦可以带菌状态寄生于动物体内，严重影响养殖业健康发展。目前，抗生素仍被认为是治疗沙门氏菌感染的主要方法，然而，随着兽用抗生素的长期使用和滥用，耐药性沙门氏菌除了使得动物疾病防治越来越棘手外，也通过食物链严重威胁人类生命健康安全。中国疾病控制中心报告的食物中毒数据显示沙门氏菌引起的发病人数比例居首，达13.8%。因此基于养殖效益、食品安全和公共卫生方面的考虑，寻找一种新的治疗沙门氏菌病疗效确实、无残留、符合国家减抗或无抗养殖发展方向的抗菌制剂乃当务之急。

噬菌体作为细菌的天敌，可以裂解宿主菌，专一性强，高效，快速杀菌，不会感染畜禽机体，也不会产生耐药性。噬菌体主要感染细菌，对动物机体和人体安全，不污染环境。2006年，美国食品药品管理局（Food and Drug Administration，FDA）批准李斯特菌噬菌体制剂在即食食品（ready-to-eat）和禽类产品中使用，随后，沙门氏菌噬菌体产品如Intralytix公司的Salmon Fresh也相继通过美国FDA评价食品添加剂的安全性指标认证（Generally Recognized as Safe，GRAS），获得FDA应用批准，这为噬菌体的商业化应用奠定了基础。

但噬菌体研究中存在许多问题，阻碍其发展。（1）噬菌体具有高度的特异性，所以治疗性噬菌体往往只对单一菌株或亚型的细菌有效，而对其他菌株裂解效果很弱或无治疗作用，使其应用的范围受到很大的限制。且由于细菌对噬菌体存在抗性现象，因此要不断对抗多种病原体的噬菌体混合制剂进行调整以适应不断出现的新型菌种。（2）噬菌体的制备要求高，不仅要去除生产宿主菌的细菌内毒素，降低免疫原性，而且需要加入合适的稳定剂，保证噬菌体的活性。因此，扩大噬菌体的裂解谱、降低制备成本是今后的研究重点。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种跨属感染鸡白痢沙门菌和猪霍乱沙门菌烈性噬菌体，实现以下发明目的：

裂解谱广，稳定性能好，对鸡白痢、猪霍乱的治疗效果好。

为解决上述技术问题，本发明采取以下技术方案：

一株跨属烈性噬菌体，所述噬菌体，保藏编号为CCTCC NO： M 2020838。

以下是对上述技术方案的进一步改进：

所述噬菌体对猪霍乱沙门菌强毒株C78-2、弱毒疫苗株C500、鸡白痢沙门菌C79-13、S06004、RKS5078、CDC1983-67、均具有良好的裂解能力。

以猪霍乱沙门菌弱毒疫苗株为宿主菌进行噬菌体的发酵，然后采取高压匀浆工艺进行噬菌体的提取。

所述宿主菌为猪霍乱沙门菌弱毒疫苗株C500。

所述高压匀浆，匀浆压力为53-57 MPa。

制备的噬菌体产品，效价≧1*10¹⁰pfu/mL；优选为1.40～1.45*10¹⁰pfu/mL；