[发明专利]一种高纯度藻蓝蛋白及其从螺旋藻中提取的方法

权利要求书

1.一种从螺旋藻中提取高纯度藻蓝蛋白的方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)螺旋藻破壁：将螺旋藻粉浸泡于氯化钠溶液中，离心，得上清液；

(2)藻蓝蛋白粗提纯：向步骤(1)上清液中加入多功能化硅胶材料I，搅拌，过滤，取上清液，得藻蓝蛋白粗提液；所述多功能化硅胶材料I的化学式为：[(O_3/2)Si(CH₂)_xS(CH₂)_yNH(CH₂CH₂NH)_zH]_a[Si(O_4/2)]_b[(CH₂)_uWSi(O_3/2)]_c；

其中，x是从2到12的整数；y是从3到12的整数；z是0到100的整数；u是从2到12的整数；W是SH或S(CH₂)_vSH，v是2到6的整数；a，b，c均为整数，且a+c：b的比例介于0.000001至100，a和b始终存在，当c大于零时，c与a+b的比介于0.000001至10；

(3)藻蓝蛋白精提纯：向步骤(2)上清液中加入多功能化硅胶材料II，搅拌，过滤，洗脱，干燥，得高纯度藻蓝蛋白；所述多功能化硅胶材料II的化学式为：[[(O_3/2)Si(CH₂)_xP(＝O)(OM)₂]_mFe_n]_a[Si(O_4/2)]_b[(CH₂)_uWSi(O_3/2)]_c[VSi(O_3/2)]_d；

其中，M是H、碱金属、碱土金属，x是从2到12的整数；u是从2到12的整数；W是SH或S(CH₂)_vSH，v是2到6的整数；V选自C_1-22-烷基、C_1-22-烷基芳基、芳基、C_2-20-烷基硫醚基、C_1-12烷基、C_2-20-亚烷基硫醚烷基、C_2-20-烷基硫醚芳基、C_2-20-亚烷基硫醚芳基；a，b，c，d，m，n均为整数，且a+c+d：b的比例介于0.000001至100，a和b均始终存在，当c或d或二者均大于零时，c+d与a+b的比例介于0.000001至100；m与n的比值介于100～0.01；

所述步骤(3)中的洗脱包括：

a.向过滤后的固体中加入0.005～0.01M磷酸缓冲液搅拌0.5～2h，固液比为1:50～1000g/ml，用200目滤布过滤，保留固体；

b.向步骤a所得固体中加入0.05～0.5M的磷酸缓冲液搅拌2～4h，固液比为1:1～10g/ml，用40目滤布过滤，保留液体；

c.对步骤a所得固体重复两次步骤b，保留液体。

2.根据权利要求1所述的一种从螺旋藻中提取高纯度藻蓝蛋白的方法，其特征在于：所述步骤(1)为按固液比1：10～50g/ml，将螺旋藻粉加入0.01-0.1M氯化钠溶液中浸泡2-8h，再以6000rpm的转速离心30min。

3.根据权利要求1所述的一种从螺旋藻中提取高纯度藻蓝蛋白的方法，其特征在于：步骤(2)和步骤(3)中，所述多功能化硅胶材料I和所述多功能化硅胶材料II的粒径均为200～500um，搅拌时间均为2～8h，搅拌温度均为10～40℃，过滤所用滤布目数均为200目。

4.根据权利要求1所述的一种从螺旋藻中提取高纯度藻蓝蛋白的方法，其特征在于：步骤(2)和步骤(3)中，所述多功能化硅胶材料I和所述多功能化硅胶材料II与含藻蓝蛋白液体的固液比均为：10～25g/L。