[发明专利]一株活不动杆菌及其菌剂和应用

说明书

本发明公开了一株活不动杆菌及其菌剂和应用，属于微生物技术领域，命名为活不动杆菌KJ‑1，于2020年9月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号CGMCC No.20664。该菌株及其菌剂能够利用正十二烷作为唯一碳源生长繁殖，且具有石油烃降解功能，特别是对于石油组分之一的正构烷烃具有非常显著的降解效果，可以应用于石油烃污染物的处理，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于微生物及环保技术领域，具体涉及一株活不动杆菌及其菌剂和应用。

背景技术

随着经济快速发展，石油作为人类最重要的能源之一，污染问题日益严重，引起各国专家的关注。目前对于石油污染土壤的修复技术，主要包括物理、化学及生物修复技术。其中，无论是物理还是化学方法，对修复土壤的破坏都比较大，即便能够使石油烃的含量达到标准，土壤的再利用率也值得质疑。除此之外，物理方法的工程量比较大，有时还需异位修复，人力、物力以及财力消耗较大，而化学方法也面临二次污染和成本的问题。研究表明，微生物修复因其成本低、无二次污染、处理效果好等特点，已成为修复石油污染土壤的关键技术，具有显著的社会效益和环境效益。因此，获得石油高效降解菌是提高其生物降解效率的重要环节。

石油是由分子量不同的烷烃、芳香烃、沥青质、树脂等4大类物质组成的混合物，其中各种链长的烷烃比例在50%～70%之间，是石油烃污染的主要成分，其生物降解一直是研究热点和重点。目前，已分离到90多属200多种石油烃降解菌，包括细菌、酵母、真菌，细菌则是石油烃代谢降解的主要参与者。关于烷烃降解菌的研究，各国学者已筛选出众多能够以烷烃为唯一碳源和能源进行代谢的，包括假单胞菌、芽孢杆菌、不动杆菌、微杆菌、节杆菌、微球菌等在内的细菌，这些微生物以烷烃为唯一碳源和能源在环境中分布，为石油烃类污染土壤的微生物修复领域更大程度地提供了新的菌种资源，不动杆菌属（Acinetobacter）作为一种重要的烷烃降解微生物属，其普遍分布于土壤中，可通过自身的乳化作用实现烷烃的消解。

由于烷烃是石油及其产品中的主要成分，同时也是多种石化废水中的主要污染物之一，仅仅依靠自然界中的土著微生物对烷烃进行降解不能满足实际修复应用，因此如何获得高效的烷烃降解菌，对提高石油烃污染土壤的修复效果具有十分重要的意义。

发明内容

针对现有技术中存在的土著微生物对烷烃降解能力差的问题，本发明提供了一株活不动杆菌及其菌剂和应用，该菌株具有石油烃降解功能，特别是对于石油组分之一的正构烷烃具有非常显著的降解效果，可以应用于石油烃污染物的处理。

本发明通过以下技术方案实现：

一株活不动杆菌（Acinetobacter vivianii），命名为活不动杆菌KJ-1，于2020年9月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号CGMCCNo.20664。

本发明中活不动杆菌菌剂，包含权利要求1所述的活不动杆菌KJ-1活性成分。

进一步地，所述的活不动杆菌菌剂的制备方法为：取活不动杆菌KJ-1发酵液按体积质量比1:1.5-2.5的比例与灭菌的草炭混合，自然风干，得活不动杆菌菌剂。

进一步地，所述的活不动杆菌KJ-1发酵液的制备方法为：

（1）取活不动杆菌KJ-1接种到营养琼脂培养基中，在28～30℃培养20～28h，制得活化菌株；

（2）将步骤（1）制得的活化菌株按照2-10%接种量接入营养肉汤液体培养基中，25～30℃、150～200rpm摇床培养20～28h，制得发酵液。

进一步地，步骤（1）中所述的营养琼脂培养基每升培养基包括蛋白胨 10g，牛肉粉3g，氯化钠 5g，琼脂 18.0 g，余量为水，pH值7.0～7.4；步骤（2）中所述的营养肉汤液体培养基每升培养基包括蛋白胨 10g，牛肉粉 3g，氯化钠 5g，余量为水，pH值7.0～7.4。