[发明专利]一种在琼脂平板上纯化裸藻的方法

权利要求书

1.一种在琼脂平板上纯化裸藻的方法，包括以下步骤：

1)将含有裸藻细胞的待纯化水样置于光照条件下培养，收集趋光富集的裸藻，离心，收集沉淀；所述光照在待纯化水样的藻液面的侧面施加，所述光照的光线与所述待纯化水样的藻液面的水平夹角≤60°；所述光照的光照强度为3000～30000lx；

2)采用EM液体培养基对所述沉淀进行清洗，得到待纯化藻液；所述EM液体培养基还包括氯化钠；所述EM液体培养基中氯化钠的质量浓度为0.5％～1.5％；所述EM液体培养基的pH值为3～5；

3)采用EM平板培养基对所述待纯化藻液进行滴点纯化，待平板上长出裸藻藻落，挑取所述裸藻藻落转接EM平板培养基进行平板划线纯化，至平板上长出无菌的裸藻藻落，完成纯化；所述EM平板培养基的pH值为3.5～5。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述光照的光照强度为8000～20000lx。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述离心的转速为2000～4000rpm，所述离心的时间为0.5～1.5min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待纯化水样为野外采集获得；所述野外采集的方法包括以下步骤：取水面裸藻和裸藻下层的水样，对所述水样进行无菌抽滤，收集滤液，得到无菌下层水样；将水面裸藻用无菌下层水样清洗2～3次，得到清洗液，对所述清洗液进行离心，收集沉淀后重悬于无菌下层水样中，得到待纯化水样。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，每次清洗采用的无菌下层水样和水面裸藻的体积比为(500～1000)：(1～5)。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述EM液体培养基替换为所述无菌下层水样。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述清洗的次数为2～3次。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中所述EM平板培养基中琼脂的浓度为1.5～2g/100mL。