[发明专利]一种奥曲肽的制备方法

权利要求书

1.一种奥曲肽的制备方法，其特征在于，包括步骤：

(1)固相合成获得全保护的线性七肽树脂，所述线性七肽的氨基酸序列为D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys；

(2)利用全保护切割试剂对所述线性七肽树脂进行切割，获得第一切割液，所述第一切割液中含有全保护的线性七肽，对所述第一切割液进行旋蒸处理，以便获取所述全保护的线性七肽；

(3)将所述全保护的线性七肽与苏氨醇混合，进行缩合反应，以便获得全保护的线性八肽中间体；

(4)利用第二切割试剂切割所述线性八肽中间体，获得第二切割液，以便获取线性奥曲肽粗品；

(5)利用二硫键配对试剂将所述线性奥曲肽粗品氧化，以便获取产物奥曲肽；

其中，所述全保护切割试剂为三氟乙醇/DCM溶液；

所述二硫键配对试剂为双氧水。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述全保护的线性七肽树脂通过以下方法获得：

1)以树脂为载体，将Fmoc-Cys(trt)-OH及DIEA加入所述树脂中，投料比为树脂：Fmoc-Cys(trt)-OH：DIEA＝1:(1-6):(2-12)，以便获取连接有Cys的树脂；

2)依次将Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH和Boc-D-Phe-OH逐个偶连到所述连接有Cys的树脂上，以便获取所述全保护的线性七肽树脂；

其中，氨基酸偶联过程中使用的缩合剂选自DIC、EDCI、HATU、HCTU、PyAOP、PyBOP中的至少之一。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述树脂为经DMF和/或DCM溶胀的树脂，所述树脂选自2-Cl-trityl resin、SASRIN resin；

任选地，所述树脂、每一种带有保护基的氨基酸以及所述缩合剂之间的摩尔比为1:(2-6):(2-6)。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述全保护切割试剂的浓度为20％-50％v/v；

任选地，所述全保护切割试剂与所述线性七肽树脂的体积质量比为(5-50)mL:1g；

任选地，进行切割的时间为2-3h。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述全保护的线性七肽与苏氨醇的摩尔比为1：(1-10)；

任选地，所述缩合反应在DCM中进行，反应时间2-12h。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述第二切割试剂为TIPS、EDT、苯酚、茴香硫醚、水中的至少之一和TFA的混合液；

任选地，所述第二切割试剂中TFA的浓度为85％-97.5％v/v；

任选地，所述第二切割试剂切割所述线性八肽中间体的时间为2-3h。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)进一步包括将所述第二切割液进行浓缩、沉淀、过滤，以便获取所述线性奥曲肽粗品；

其中，沉淀时所用的沉淀剂选自冰乙醚、冰甲基叔丁基醚。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(5)中，对所述线性奥曲肽粗品进行氧化的步骤如下：

获取所述线性奥曲肽粗品的水溶液，所述线性奥曲肽粗品的水溶液的浓度为1-10mg/mL，pH为7-9，将所述线性奥曲肽粗品的水溶液与双氧水混合，进行氧化反应，以便获取产物奥曲肽。