[发明专利]一种羊X、Y精子分选液、分选浮游体系及分选方法在审
| 申请号： | 202110166505.5 | 申请日： | 2021-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN112852720A | 公开（公告）日： | 2021-05-28 |
| 发明（设计）人： | 胡建宏;任发;任毅杰;李宇;席华明;温飞;贤明;赵梦洁;朱大伟;王立强;雷安民;李延华 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N5/076 | 分类号： | C12N5/076 |
| 代理公司： | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人： | 史玫 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种羊 精子 分选 浮游 体系 方法 | ||
1.一种羊X、Y精子分选液，其特征在于，所述羊X、Y精子分选液为含有葡萄糖、柠檬酸、番茄红素、柠檬酸钠、EDTA、碳酸氢钠、氯化钾、Tris、BSA和TLR7/8蛋白激动剂的水溶液。
2.如权利要求1所述的羊X、Y精子分选液，其特征在于，所述TLR7/8激动剂选自瑞喹莫德R848。
3.如权利要求1所述的羊X、Y精子分选液，其特征在于，1L水中含有葡萄糖27～31g/L、柠檬酸0.4～0.8g/L、番茄红素0.2～0.6g/L、柠檬酸钠1.9～2.3g/L、EDTA 0.3～0.7g/L、碳酸氢钠0.9～1.3g/L、氯化钾0.7～1.1g/L、Tris 5.6～6.0g/L、BSA 0.4～0.8g/L和瑞喹莫德R8480.3～1μM。
4.一种羊X、Y精子分选浮游体系，其特征在于，包括精液稀释洗涤液和权利要求1-3任一权利要求所述的羊X、Y精子分选液，且精液稀释洗涤液和羊X、Y精子分选液各自独立包装。
5.如权利要求4所述的羊X、Y精子分选浮游体系，其特征在于，所述精液稀释洗涤液是包含Tris、柠檬酸和果糖的水溶液。
6.如权利要求5所述的羊X、Y精子分选浮游体系，其特征在于，所述精液稀释洗涤液的配方为：100mL水中含Tris 200～300mM，柠檬酸80～90mM和果糖65～75mM。
7.一种羊X、Y精子分选方法，其特征在于，方法包括：
采用精液稀释洗涤液对羊精液进行洗涤，离心去上清后得精液样品；
将精液样品与权利要求1所述分选液混合，合适条件下孵育，得到上下分层的孵育后体系，其中上层液体为含Y精子液体，下层液体为含X精子液体。
8.如权利要求7所述的羊X、Y精子分选方法，其特征在于，还包括，利用精液稀释洗涤液分别对上层液体和下层液体进行洗涤，离心去上清后用精液稀释洗涤液重悬得到Y精子体系和X精子体系。
9.如权利要求4所述的羊X、Y精子分选方法，其特征在于，所述合适条件为35～38.5℃，孵育15～30min。
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