[发明专利]一种蛋白核小球藻抗氧化肽及其制备方法有效
| 申请号： | 202110167140.8 | 申请日： | 2021-02-05 |
| 公开（公告）号： | CN112876548B | 公开（公告）日： | 2022-08-09 |
| 发明（设计）人： | 王际辉;肖珊;王璐;王波;蔡燕雪 | 申请（专利权）人： | 东莞理工学院 |
| 主分类号： | C07K14/405 | 分类号： | C07K14/405;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/14;C12P21/06 |
| 代理公司： | 大连万友专利代理有限公司 21219 | 代理人： | 王丽新 |
| 地址： | 523808 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白 小球藻 氧化 及其 制备 方法 | ||
1.一种蛋白核小球藻抗氧化肽，其特征在于：所述肽的氨基酸序列为∶VPADDL。
2.一种权利要求1所述的蛋白核小球藻抗氧化肽的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）蛋白核小球藻粉破壁处理；（2）蛋白核小球藻蛋白提取；（3）蛋白核小球藻多肽制备；称取蛋白核小球藻蛋白，加20倍的纯水溶解，加3%碱性蛋白酶，调pH至8.0、酶解温度60℃，酶解时间6h，酶解结束后升温至100℃灭酶10min，调节pH至2.0，酶解温度37℃，加入2%胃蛋白酶酶解2h，调节pH至7.5，酶解温度37℃，加入2%胰酶酶解2h，酶解结束后升温至100℃灭酶10min，得到蛋白核小球藻多肽酶解液，冷藏备用；（4）蛋白核小球藻多肽的分离纯化。
3.根据权利要求2所述的蛋白核小球藻抗氧化肽的制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）中蛋白核小球藻粉的具体破壁方法为：将蛋白核小球藻粉过60目筛去除杂物，蛋白核小球藻粉与纯净水的液料比为10：1；超声30 min，细胞破碎仪处理15 min后，冷冻干燥为破壁蛋白核小球藻粉，装袋备用。
4.根据权利要求2所述的蛋白核小球藻抗氧化肽的制备方法，其特征在于：所述的步骤（2）中蛋白核小球藻蛋白提取的具体方法为：称取破壁蛋白核小球藻粉，按照质量体积比1：30的比例加入纯水，并充分搅拌溶胀，调节pH至5.0，酶解温度50℃，加入1%纤维素酶酶解3h，酶解结束后升温至100℃灭酶10min，后于超声功率480w超声辅助提取40分钟，再均质10分钟， 8000r/min离心10分钟，取沉淀冷冻干燥，即得蛋白核小球藻蛋白。
5.根据权利要求2所述的蛋白核小球藻抗氧化肽的制备方法，其特征在于：所述的步骤（4）蛋白核小球藻多肽的分离纯化的具体方法为：用截留分子量3000Da的超滤膜制备分子量小于3000Da的蛋白核小球藻多肽溶液；将多肽溶液60℃真空浓缩后冷冻干燥，得到分子量小于3000Da的蛋白核小球藻多肽；将分子量小于3000Da的蛋白核小球藻多肽用SephadexG-15凝胶层析进行分离，即得到所述蛋白核小球藻抗氧化肽。
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