[发明专利]四氧化三锰纳米颗粒制备方法及用途

权利要求书

1.一种四氧化三锰纳米探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1）将交联剂溶于溶剂中，得到交联剂溶液；将交联剂溶液与生物分子缓冲溶液混合，得到第一溶液；所述生物分子为肿瘤组织细胞高表达的蛋白质的靶向序列或透明质酸；所述交联剂为4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐（Sulfo-SMCC）、4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷羧酸-N-琥珀酰亚胺酯（SMCC）、琥珀酰亚胺基-4-[N-马来酰亚胺甲基]-环己烷-1-羧基-[6-氨基己酸盐]（LC-SMCC）、1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物（EDC）中的一种或几种；所述交联剂溶液的浓度为2~10 g/L，所述生物分子缓冲溶液的浓度为5~20 mmol/L，所述生物分子与交联剂的摩尔比为1∶（1~2）;所述肿瘤组织细胞高表达的蛋白质为人表皮生长因子受体-2蛋白;

步骤2）将蛋白分子缓冲溶液与第一溶液混合，经交联反应后，透析纯化，冻干，得到修饰蛋白；所述蛋白分子为牛血清白蛋白、蛋清蛋白中的一种或几种；所述蛋白分子缓冲溶液的浓度为5~50 g/L，蛋白分子与生物分子的摩尔比为1：（1~20）；

步骤3）将二价锰盐水溶液滴加入修饰蛋白溶液中，混匀，得到复合溶液；调节复合溶液pH值至10或10以上，搅拌，透析纯化，冻干，得到四氧化三锰纳米探针；所述二价锰盐选自氯化锰、硝酸锰、乙酸锰、硫酸锰中的一种或几种，所述修饰蛋白与锰元素的摩尔比为1：（100~500）。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1）中，所述溶剂为DMSO、DMF、pH为5~6的磷酸盐缓冲溶液（PBS）中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2）中，所述透析纯化的条件为：截留分子量3000~15000 Da，透析时间5~20小时；

步骤3）中，所述透析纯化的条件为：截留分子量3000~15000 Da，透析时间5~20小时。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3）中，所述调节复合溶液pH值的试剂为碱性试剂，所述碱性试剂为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氨水、三乙胺、吡啶、N-甲基吗啉、四甲基乙二胺中的一种或多种；所述搅拌的温度为30~37℃，搅拌的时间为1~10小时，搅拌的转速为 200~1000 r/min。

5.权利要求1至4中任一项所述制备方法制得的四氧化三锰纳米探针，其特征在于，所述四氧化三锰纳米探针的粒径为1~100纳米。

6.权利要求5所述四氧化三锰纳米探针在制备核磁共振成像增敏剂中的用途。

7.权利要求5所述四氧化三锰纳米探针在制备生物酶中的用途；所述生物酶具有过氧化氢活性，能有效催化过氧化氢。