[发明专利]荧光硫脲衍生化试剂在3-氯-1,2-丙二醇检测中的应用

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及荧光硫脲衍生化试剂在3‑氯‑1,2‑丙二醇检测中的应用。本发明的有益效果在于：1)本发明所采用的荧光硫脲类衍生化试剂荧光效率高，使得该方法检测灵敏度非常高；2)本发明所采用的荧光衍生化反应专一性好，转化率高，并且衍生化试剂与目标产物的疏水性差异较大，在反相高效液相色谱中极易分离，因而易于排除基质效应干扰，提高检测准确度；3)使用普通的液相色谱‑荧光法进行测定，设备投资较GC‑MS大为降低，且对操作者要求较低，易于推广应用。

技术领域

本发明属于分析化学领域，更具体地，涉及荧光硫脲衍生化试剂在3-氯-1,2-丙二醇检测中的应用。

背景技术

3-氯-1,2-丙二醇又称3-氯丙二醇或氯甘油，其英文名为3-monochloro-1,2-propanediol，简写3-MCPD，近年来的毒性研究表明，3-MCPD对人体健康具有较强的危害，主要表现为具有一定的急、慢性毒性；遗传毒性与神经毒性等，已成为一种国际公认的食品化学污染物。

最初，食品中氯丙醇的污染首先是在以酸水解植物蛋白(HVP)为原料的调味品(如鸡精和酱油等)中发现的，然后陆续在麦芽提取物、变性淀粉、肉类提取物、饼干、面包、香肠、谷物类中检出。2006年捷克的ZelinkováZ.等首先发现在食用油中存在氯丙醇脂肪酸酯。2007年Seefelder W.等研究发现在精炼油脂中氯丙醇脂肪酸酯的含量范围在0.2～20mg/kg之间，其中精炼植物油按照菜籽油、大豆油、葵花籽油、红花油、核桃油和棕榈油的数序递增。

环境水体中，由于工业废水的排放会导致一定程度的3-MCPD污染，如酸水解植物蛋白生产废水的排放、纸浆生产过程中湿强剂-聚酰胺聚胺表氯醇树脂的使用都是产生3-MCPD污染的重要来源，如不经处理会导致附近水体的污染；另外，在水处理过程中多胺絮凝剂的使用也会产生一定程度的3-MCPD污染。

正由于3-MCPD对人体危害严重，许多国家都制定了限量标准来控制食品及饮用水中的该项污染物，如欧盟在2001年制订了限量标准，规定不得超过每日20μg/kg.bw的摄入量；我国也建立了检测酱油中3-MCPD的国家标准。英国饮用水检查机构(Drinking WaterInspectorate)规定饮用水中3-MCPD的最大含量不得超过0.1mg/L。由于食品及饮用水中3-MCPD安全限均达到ppb级，故必须采用灵敏度高的检测方法才能达到监控要求，目前常用的手段主要为气相色谱(GC)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)。由于3-MCPD的极性与沸点较高，测定过程中均需要将3-MCPD从基质中富集、萃取出来，然后进行衍生化。常用的萃取方法有液-液萃取(LLE)、基质固相分散萃取(MSPD)、固相微萃取(SPME)等；而衍生化方法则主要有酮类衍生、硼酸类衍生(苯基硼酸、丁基硼酸)、N,O-双三甲基-三氟乙酰胺(BSTFA)、酸酐类衍生(HFBA)、七氟丁酰咪唑(HFBI)等。然而，由于3-MCPD水溶性好，沸点较高，故基于气相色谱测定3-MCPD的分析方法具有前处理过程复杂、繁琐，衍生化条件苛刻、仪器使用维护成本高等缺点。

鉴于此，发展基于高效液相色谱(HPLC)的成本低、简便易行的高灵敏检测方法具有十分重要的现实意义，吴倩等将样品中的3-MCPD净化后叠氮化处理，并通过点击反应将其转换成具有生色团的三氮唑化合物，使用HPLC-紫外(UV)检测酱油中的3-MCPD；Chung等将净化后的3-MCPD通过微波-苯乙酮衍生化，采用HPLC-UV法检测酱油中的3-MCPD，基于HPLC-UV的方法总体来说检测限相对偏高。专利CN201210001681.4、CN201510020204.6报道了一种结合高碘酸氧化裂解、碱基、核苷(核苷酸)或邻氨基N杂二元环状荧光化合物衍生化的RP-HPLC-荧光(FLD)检测法，该方法测试成本低、操作简单、灵敏度高，可适用于油脂、酱油等食品中3-MCPD的测定。虽然衍生化试剂种类可选较多，但是荧光衍生化的反应机理是基本相同的，为了扩大衍生化反应的多样性与适应性，因此，开发新型荧光性能好、疏水性更强的荧光衍生化试剂将更加有利于发挥该方法的长处与优势。

发明内容