[发明专利]用于区分黄河鲤鱼与非黄河鲤鱼鲤属的引物对组合物、试剂盒及方法

说明书

本申请提供一种用于区分黄河鲤鱼与非黄河鲤鱼鲤属的引物对组合物、试剂盒及方法，属于分子鉴定技术领域。引物对组合物包括以下核苷酸序列的标记引物对：SEQ ID NO.1和2、NO.3和4、NO.5和6、NO.7和8、NO.9和10、NO.11和12、NO.13和14、NO.15和16、NO.17和18、NO.19和20以及NO.21和22。试剂盒包括上述引物对组合物，以及核苷酸序列为SEQ ID NO.23和24的阳性对照引物。采用该引物对组合物或该试剂盒对鲤鱼样本的基因组DNA进行PCR扩增，然后根据扩增情况判断鲤属，能够准确地鉴别区分黄河鲤鱼与非黄河鲤鱼鲤属，而且，区分方法简单便捷且成本低。

技术领域

本申请涉及分子鉴定技术领域，具体而言，涉及一种用于区分黄河鲤鱼与非黄河鲤鱼鲤属的引物对组合物、试剂盒及方法。

背景技术

黄河鲤以其体型梭长、金鳞赤尾且肉质鲜美而驰名中外；而且，黄河鲤生长速度快、抗逆性强且营养价值高，因此备受养殖户和消费者的青睐，具有广阔的市场前景。黄河鲤市场价格远高于普通鲤鱼，受到经济利益的驱使，不良商家销售冒牌黄河鲤的情况时有发生。在一方面，侵害了消费者的合法权益；另一方面，损害了黄河鲤的名声，给黄河鲤相关产业的正常运作造成了干扰。

因此，亟需建立一种行之有效的方法对市场上的鲤鱼进行鉴别，以准确区分黄河鲤鱼与非黄河鲤鱼鲤属。

发明内容

本申请的目的在于提供一种用于区分黄河鲤鱼与非黄河鲤鱼鲤属的引物对组合物，能够准确地鉴别区分黄河鲤鱼与非黄河鲤鱼鲤属，而且，区分方法简单便捷且成本低。

本申请的实施例是这样实现的：

第一方面，本申请提供一种用于区分黄河鲤鱼与非黄河鲤鱼鲤属的引物对组合物，包括以下核苷酸序列的标记引物对：SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2；SEQ ID NO.3和SEQID NO.4；SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6；SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8；SEQ ID NO.9和SEQ IDNO.10；SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12；SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14；SEQ ID NO.15和SEQID NO.16；SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18；SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.20；以及SEQ IDNO.21和SEQ ID NO.22。

第二方面，本申请提供一种用于区分黄河鲤鱼与非黄河鲤鱼鲤属的试剂盒，包括阳性对照引物对以及如第一方面提供的引物对组合物，阳性对照引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24所示。

第三方面，本申请提供一种用于区分黄河鲤鱼与非黄河鲤鱼鲤属的方法，包括：采用如第一方面提供的引物对组合物或者如第二方面提供的试剂盒对鲤鱼样本的基因组DNA进行PCR扩增。

将引物对组合物分为第一标记组、第二标记组、第三标记组、第四标记组和第五标记组。

若有5个标记组出现扩增产物则判断鲤鱼样本为黄河鲤鱼鲤属，否则判断鲤鱼样本为非黄河鲤鱼鲤属。

第一标记组包括以下核苷酸序列的标记引物对：SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2；SEQID NO.3和SEQ ID NO.4；SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14；以及SEQ ID NO.17和SEQ IDNO.18。

第二标记组包括以下核苷酸序列的标记引物对：SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6；以及SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8。

第三标记组包括以下核苷酸序列的标记引物对：SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10；以及SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16。