[发明专利]一种利用胚乳特异性自杀获得非转基因的定向基因突变植株的方法及其应用在审
| 申请号： | 202110171762.8 | 申请日： | 2021-02-08 |
| 公开（公告）号： | CN112899303A | 公开（公告）日： | 2021-06-04 |
| 发明（设计）人： | 和玉兵;占华东 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;C12N15/55;A01H5/10;A01H6/46 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 刘妍妍 |
| 地址： | 210095 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 胚乳 特异性 自杀 获得 转基因 定向 基因突变 植株 方法 及其 应用 | ||
1.一种利用胚乳特异性自杀获得非转基因的定向基因突变植株的方法，其特征在于，包括以下步骤：
构建用于对植物进行遗传转化的构建体，所述构建体含有第一核酸分子和第二核酸分子，所述第一核酸分子为基因编辑元件；所述第二核酸分子为胚乳致死或停止发育元件；将需要处理的植株通过引入构建体外源核酸分子实施转基因。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一核酸分子为能够编辑核酸的基因元件。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述编辑核酸的基因元件选自任意一种基因编辑系统的基因元件构成的组。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的基因编辑系统选自ZFN基因编辑系统、TALEN基因编辑系统、CRISPR/CAS9基因编辑系统或CRISPR/CPF1基因编辑系统。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，其中所述CRISPR/CAS9基因编辑系统的基因元件包括CAS9基因和gRNA基因；所述的CAS9基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述gRNA基因的核心骨架的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
7.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二核酸分子为胚乳致死或停止发育的基因元件。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二核酸分子的核苷酸序列如SEQ IDNO：3所示。
9.权利要求1～8任一项所述的方法在植物育种中的应用。
10.权利要求9所述的应用，其特征在于，所述植物为种子植物。
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