[发明专利]甲基化修饰KRAS4B蛋白及其应用

说明书

本发明属于蛋白修饰技术领域，具体涉及一种甲基化修饰KRAS4B蛋白及其应用。本发明提供的甲基化修饰KRAS4B蛋白中的至少一个氨基酸为甲基化修饰的氨基酸。经甲基化修饰，可以促进修饰后蛋白的降解速率，降低其稳定性。本发明还提供了SETD7在KRAS4B蛋白甲基化修饰中的应用及相应的作用位点。本发明提供的甲基化修饰KRAS4B蛋白可用于制备多种功能制剂，在KRAS4B蛋白的调控、肿瘤患者的疾病治疗和预后等方面具有重要意义。

技术领域

本发明属于蛋白修饰技术领域，具体涉及一种甲基化修饰KRAS4B蛋白及其应用，SETD7在制备甲基化修饰KRAS4B蛋白中的应用，以及一种包括甲基化修饰KRAS4B蛋白的制剂。

背景技术

KRAS基因，其全名为Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog，中文名称为“Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物”，属于RAS超蛋白家族，是一种具有GTPase酶活性的鸟嘌呤核苷结合蛋白。KRAS基因可转录出两个剪接变异体(transcriptionalvariants)，即KRAS4A和KRAS4B。KRAS4B蛋白有188个氨基酸，其分子量为21.6kDa,在多种肿瘤的发生发展中扮演关键性的重要角色，也是肿瘤中突变频率较高的基因。

研究发现，KRAS4B的激活突变不仅对于肿瘤细胞的增殖具有促进作用，还能够对肿瘤微环境产生影响，进一步促进癌症的发生和发展。因此研究一种能抑制突变型KRAS4B蛋白的药物或手段，是目前KRAS研究的方向之一。

发明内容

本发明的目的是提供一种甲基化修饰KRAS4B蛋白及其应用，赖氨酸甲基转移酶SETD7(SET Domain Containing 7,Histone Lysine Methyltransferase)在制备甲基化修饰KRAS4B蛋白中的应用，以及一种包括甲基化修饰KRAS4B蛋白的制剂，旨在解决现有KRAS4B突变对肿瘤细胞生长的促进作用。

为了实现上述发明目的，本发明一方面，提供了一种甲基化修饰KRAS4B蛋白，所述甲基化修饰KRAS4B蛋白中的至少一个氨基酸为甲基化修饰的氨基酸。

本发明通过对KRAS4B蛋白中的至少一个氨基酸进行甲基化修饰，所得甲基化修饰KRAS4B蛋白的降解速率明显加快，泛素化程度显着上升，具有更低的稳定性，有利于抑制KRAS4B蛋白的促癌活性，减少或抑制KRAS4B所带来的负面影响，具有良好的应用前景。

本发明另一方面，提供了赖氨酸甲基转移酶SETD7在制备甲基化修饰KRAS4B蛋白中的应用。

本发明的发明人发现甲基转移酶SETD7可与KRAS4B蛋白相互作用。经一系列实验验证确认赖氨酸甲基转移酶SETD7作用于KRAS4B的位点为KRAS4B蛋白中的第182位的赖氨酸和第184位的赖氨酸。同时，SETD7作用于KRAS4B蛋白，可以使其第182位的赖氨酸和第184位的赖氨酸中的至少一个位点发生甲基化，进而得到甲基化修饰的KRAS4B蛋白，具有降低KRAS4B蛋白稳定性的作用。

本发明再一方面，提供了SETD7在促进KRAS4B蛋白降解和/或降低KRAS4B蛋白稳定性中的应用。

由于SETD7可以作用于KRAS4B蛋白，使其第182位的赖氨酸和第184位的赖氨酸中的至少一个发生甲基化，使所得甲基化修饰KRAS4B蛋白具有较低的稳定性，因此可将SETD7用于促进KRAS4B蛋白降解和/或降低KRAS4B蛋白稳定性。

本发明又一方面，提供了甲基化修饰KRAS4B蛋白在制备抑制或治疗肿瘤疾病的药物、抑制肺腺癌细胞增殖的制剂、抑制ERK1/2信号通路的制剂和/或抑制AKT信号通路的制剂中的多个应用。