[发明专利]KRAS基因突变检测的引物探针组、试剂盒及其应用在审

专利信息
申请号: 202110172806.9 申请日: 2021-02-08
公开(公告)号: CN112795653A 公开(公告)日: 2021-05-14
发明(设计)人: 张核子;陈伟虹;卢晓萍;操利超;张付瑶;丁世涛 申请(专利权)人: 深圳市核子基因科技有限公司
主分类号: C12Q1/6886 分类号: C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11
代理公司: 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 代理人: 刘燚
地址: 518055 广东省深圳*** 国省代码: 广东;44
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: kras 基因突变 检测 引物 探针 试剂盒 及其 应用
【权利要求书】:

1.KRAS基因突变检测的引物探针组,其特征在于,包括:

检测KRAS基因突变的引物对:

上游引物:5'-CCTGCTGAAAATGACTGAATATAAAC-3',

下游引物:5'-TCTATTGTTGGATCATATTCGTCCAC-3';

检测突变型KRAS基因的突变型探针,包括:

检测KRAS基因第12密码子G12D突变的G12D探针:5'-TACGCCATCAGCTC-3',

检测KRAS基因第12密码子G12V突变的G12V探针:5'-TACGCCAACAGCTC-3',

检测KRAS基因第12密码子G12S突变的G12S探针:5'-TACGCCACTAGCTC-3',

检测KRAS基因第12密码子G12C突变的G12C探针:5'-TACGCCACAAGCTC-3',

检测KRAS基因第12密码子G12A突变的G12A探针:5'-TACGCCAGCAGCTC-3',

检测KRAS基因第12密码子G12R突变的G12R探针:5'-TACGCCACGAGCTC-3',

检测KRAS基因第13密码子G13D突变的G13D探针:5'-TACGTCACCAGCTC-3';

检测野生型KRAS基因的野生型探针,包括:5'-TACGCCACCAGCTC-3'。

2.根据权利要求1所述的引物探针组,其特征在于,所述野生型探针和/或所述突变型探针进行了锁核酸修饰;

优选的,所述G12D探针的第5、7、8个碱基进行了锁核酸修饰,所述G12V探针的第4、7、8个碱基进行了锁核酸修饰,所述G12S探针的第7、8个碱基进行了锁核酸修饰,所述G12C探针的第4、7、9个碱基进行了锁核酸修饰,所述G12A探针的第5、8个碱基进行了锁核酸修饰,所述G12R探针的第5、7个碱基进行了锁核酸修饰,所述G13D探针的第5、7个碱基进行了锁核酸修饰,所述野生型探针的第6、7个碱基进行了锁核酸修饰。

3.根据权利要求1所述的引物探针组,其特征在于,还包括内参引物和内参探针;

优选的,所述内参引物包括检测ACTB基因的引物对:

上游引物:5'-CTTTCTGCATGTCCCCCGT-3',

下游引物:5'-AGTCCATCACGATGCCAGTG-3';

优选的,所述内参探针为检测所述ACTB基因的探针:5'-ATGTACGTTGCTATCCA-3'。

4.根据权利要求1至3任一项所述的引物探针组,其特征在于,所述探针的5'端标记有报告基团,所述探针的3'端标记有淬灭基团;

优选的,所述报告基团选自FAM、ROX、VIC、HEX、TET、JOE、NED、Cy5、Cy3;

优选的,所述淬灭基团选自BQH1、BHQ2、BHQ3、TAMARA、NFQ-MGB;

优选的,所述野生型探针和所述突变型探针的报告基团不同。

5.试剂盒,其特征在于,包括权利要求1至4任一项所述的引物探针组。

6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述引物探针组为引物探针混合液。

7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述引物探针混合液中所述引物对的浓度为10~50μmol/L,所述突变型探针和所述野生型探针的浓度为1~20μmol/L。

8.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,还包括Mg2+、dNTPs、DNA聚合酶、PCR缓冲液。

9.根据权利要求5至8任一项所述的试剂盒,其特征在于,还包括DNA提取试剂。

10.权利要求1至4任一项所述的引物探针组,或权利要求5至9任一项所述的试剂盒在制备癌症的预后试剂中的应用;

优选的,所述癌症选自胰腺癌、结直肠癌、非小细胞肺癌中的至少一种。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于深圳市核子基因科技有限公司,未经深圳市核子基因科技有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110172806.9/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code