[发明专利]桑黄发酵液多糖在抗禽流感病毒药物中的应用

权利要求书

1.一种保藏编号为CGMCC NO.21068的桑黄（Sanghuangporus sanghuang）发酵液多糖在制备抗禽流感病毒药物中的应用；

桑黄发酵液多糖通过以下方法提取：

（1）提取：取振荡培养8-10d后所得桑黄发酵液，浓缩至原体积的1/20-1/10，加2-5倍75-95%乙醇，静置醇沉12-48h后，5000 rpm 离心10-30 min得醇沉物，冷冻干燥后粉粹，过40-80目筛网，备用；

（2）过滤：取适量上述醇沉物干粉末，加50-100倍体积的蒸馏水溶解后，30-60℃超声波震荡溶解1-3 h后，磁力搅拌溶解15-30 min，5000 rpm离心10-30 min；滤渣继续用10-50倍体积的蒸馏水重复溶解两次并离心，合并3次离心上清液并浓缩，冷冻干燥后即得桑黄发酵液多糖粗提物，标记为EPS；

（3）纯化：取EPS样品，用100倍蒸馏水溶解后，8000 rpm离心10-30 min除去不溶物，上清液通过葡聚糖凝胶Sephadex G-100进行分级纯化；

（4）收集：收集纯化后的样品，干燥得到桑黄多糖；

所述的桑黄发酵液由以下方法获得：

（1）平板菌种培养方法：无菌操作，从斜面母种中取面积0.25cm²的菌种块，转接到冷却至28℃以下的平板培养基中央，置25-28℃恒温培养箱中，避光，倒置，静置培养6-10d，即得平板菌种；

（2）液体菌种培养方法：无菌操作，500毫升三角瓶，装液量200mL，接入6-8块菌龄一致，面积0.25cm²经活化的平板菌种，28℃、150 rpm，避光振荡培养6 d，即得液体菌种；

（3）液体发酵培养方法：无菌操作，将液体菌种接种到液体发酵罐中，接种量5-15%，25-30℃，120-150 rpm，避光振荡培养6-10 d后，终止发酵并用60-200目纱网过滤得桑黄发酵液。

2.根据权利要求1所述的一种桑黄发酵液多糖在抗禽流感病毒药物中的应用，其特征在于，液体菌种培养方法所使用的液体菌种培养基以百分比计：葡萄糖1-2%，酵母抽提物0.2-0.5%，KH₂PO₄ 0.05-0.1%，MgSO₄·7H₂O 0.02-0.05%，pH自然；

液体发酵培养方法所使用的液体发酵培养基以百分比计：玉米粉0.3-0.4%，葡萄糖1-2%，蛋白胨0.1-0.3%，酵母抽提物0.2-0.5%，KH₂PO₄ 0.05-0.1%，MgSO₄·7H₂O 0.02-0.08%，麸皮1-3%，pH5-pH7。