[发明专利]一种提高酿酒酵母2-苯乙醇产量的方法

权利要求书

1.一种CRISPR/Cas9基因编辑系统，其特征在于该系统包括CAS9质粒、gRNA质粒和供体DNA，所述CAS9质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述gRNA质粒的核苷酸序列如SEQID NO.2所示，所述供体DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.如权利要求1所述的一种CRISPR/Cas9基因编辑系统在敲除酿酒酵母ATF1基因中的应用。

3.利用权利要求1所述的一种CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除酿酒酵母ATF1基因的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）将CRISPR/Cas9基因编辑系统中的Cas9质粒转化到酿酒酵母菌株中；

2）以步骤1）得到的菌株作为受体，将gRNA质粒和供体DNA一起转化导入；

3）在含有潮霉素和G418的双抗平板上挑选获得候选阳性转化子，即得到敲除ATF1基因的酿酒酵母。

4.如权利要求1所述的一种CRISPR/Cas9基因编辑系统在提高酿酒酵母2-苯乙醇产量中的应用。

5.一种提高酿酒酵母2-苯乙醇产量的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）利用CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除酿酒酵母的ATF1基因；

2）利用该敲除ATF1基因的酿酒酵母进行发酵。

6.如权利要求5所述的一种提高酿酒酵母2-苯乙醇产量的方法，其特征在于该CRISPR/Cas9基因编辑系统包括CAS9质粒、gRNA质粒和供体DNA，所述CAS9质粒的核苷酸序列如SEQID NO.1所示，所述gRNA质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述供体DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。