[发明专利]一种纯化子宫腔上皮细胞、腺上皮细胞和基质细胞的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种纯化小鼠子宫腔上皮细胞、腺上皮细胞以及基质细胞的制备方法，其特征在于，由以下步骤组成：

（1）取子宫样品，放入细胞消化液1中消化，收集子宫腔上皮细胞，所述细胞消化液1每1000 μL中有860μL HBSS、40μL 5％Trypsin和100 μL Dispase II；

（2）将收集完子宫腔上皮的子宫样品放入细胞消化液2中消化，过滤，滤渣为腺上皮细胞，所述细胞消化液2每1000 μL中有700μL 10％胎牛血清、200 μL胶原蛋白水解酶Collagenase IV和100μL中性蛋白酶 Dispase II；

（3）收集滤液，离心后去除上清，培养沉淀细胞，得到基质细胞。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中采用冲洗收集子宫腔上皮细胞，冲洗液中含有HBSS。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中还包括对收集完子宫腔上皮的子宫样品进行切割处理，切割后的尺寸为0.4～0.6mm³。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中过滤尺寸为1000目。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中培养沉淀细胞采用含10％FBS的DMEM/F12培养基，35～38℃孵育30～40min，去除上清液和未贴壁细胞。

6.如权利要求1所述的细胞消化液1和所述的细胞消化液2在构建小鼠子宫内膜细胞模型中的应用。