[发明专利]泌尿系统感染病原体耐药基因检测体系及其试剂盒和应用

权利要求书

1.一种泌尿系统感染病原体耐药基因检测体系，其特征在于：包括分别针对超广谱β-内酰胺酶的blaCTX-M基因进行检测的正反向引物，针对超广谱β-内酰胺酶的blaSHV基因进行检测的正反向引物，针对碳青霉烯酶的blaKPC基因进行检测的正反向引物，针对碳青霉烯酶的blaNDM基因进行检测的正反向引物，针对碳青霉烯酶的blaIMP基因进行检测的正反向引物，针对碳青霉烯酶的blaVIM基因进行检测的正反向引物， 针对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecA基因进行检测的正反向引物，针对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecC基因进行检测的正反向引物，以及针对万古霉素耐药性肠球菌的vanA基因进行检测的正反向引物，检测样本为尿液；

针对blaCTX-M的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，针对blaCTX-M的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

针对blaSHV的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，针对blaSHV的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；

针对blaKPC的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，针对blaKPC的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；

针对blaNDM的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示，针对blaNDM的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示；

针对blaIMP的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示，针对blaIMP的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.10所示；

针对blaVIM的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.11所示，针对blaVIM的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.12所示；

针对mecA的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.13所示，针对mecA的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.14所示；

针对mecC的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.15所示，针对mecC的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.16所示；

针对vanA的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.17所示，针对vanA的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.18所示。

2.根据权利要求1所述的泌尿系统感染病原体耐药基因检测体系，其特征在于：还包括针对系统质控内参进行检测的正反向引物；针对系统质控内参的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.19所示，针对系统质控内参的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.20所示。

3.根据权利要求2所述的泌尿系统感染病原体耐药基因检测体系，其特征在于：所有正向引物在检测体系中的终浓度均为200nM；所有反向引物在检测体系中的终浓度均为200nM。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的泌尿系统感染病原体耐药基因检测体系，其特征在于：还包括多重PCR预混液、多重PCR酶液和无核酸酶纯水；所述多重PCR预混液由10×PCR缓冲液、MgCl₂和dNTPs混合而成；所述多重PCR酶液由热启动DNA聚合酶和UNG酶混合而成。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的泌尿系统感染病原体耐药基因检测体系，其特征在于：各正向引物的5’端均设有荧光标记，所述荧光标记为CY5或CY3或FAM。

6.根据权利要求1至3中任一项所述的泌尿系统感染病原体耐药基因检测体系，其特征在于：还包括阳性对照物和阴性对照物；所述阳性对照物是包括所有目的基因靶点的质粒混合物；所述阴性对照物是无核酸酶超纯水。

7.一种包括如权利要求1所述的检测体系的泌尿系统感染病原体耐药基因检测试剂盒。