[发明专利]三种microRNA作为RA标志物的应用及其试剂盒

说明书

本发明涉及circPTPN22作为分子标志物在制备类风湿关节炎的诊断试剂或试剂盒中的应用，还涉及miR‑34c‑5p、miR‑373‑3p或/和miR‑3074‑5p作为分子标志物在制备类风湿关节炎的诊断试剂或试剂盒中的应用。ROC曲线表明miR‑3074‑5p、hsa‑miR‑34c‑5p、hsa‑miR‑373‑3p不仅可单独，还可以联合作为RA诊断分子标志物。为RA的诊断和治疗提供多种新的应用方向。有研究报道micro RNA对疾病的提前诊断和发病预测都有很好的特异性和敏感性，且micro RNA稳定性好，检测结果可靠。本发明的标本为受试者外周血，样品标本易于获得，临床操作性强且对受试者属于无创伤性。

技术领域

本发明属于生物分子技术领域，涉及miR-34c-5p、miR-373-3p或/和miR-3074-5p作为类风湿关节炎标志物的应用及其试剂盒。

背景技术

类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的以滑膜炎、滑膜增生、骨软骨破坏为特征的慢性炎症疾病，最终可导致软骨或骨损伤，甚至是残疾。RA在女性中的发病率高于男性，遗传因素、环境因素和生活方式是风湿性关节炎的高危因素，如吸烟、饮酒、饮食不良等，但其发病机制尚不清楚。RA的早期诊断对于积极治疗关节或器官的不可逆损伤以及通过广泛使用常规药物和抗风湿性关节炎药物(DMARDs)控制慢性炎症至关重要。然而，部分类风湿因子和环瓜氨酸抗体均为阴性的RA患者可能会被误诊，延误可能导致临床预后恶化。因此，探讨RA的病因病机对RA的早期预防、早期诊断和有效干预具有重要价值。

小分子核糖核酸(microRNA，miRNA)是一种18-25nt长的内源性非编码RNA，广泛分布在多个真核生物，通过调节mRNA的降解或翻译抑制来调节一个或多个基因的表达。miRNA的合成和功能的分子机制已被广泛研究。随着分子生物学的发展，miRNA可以影响免疫系统的各个方面，从造血到效应功能，但其在RA中的作用机制尚未明确。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供circPTPN22作为分子标志物在制备类风湿关节炎的诊断试剂或试剂盒中的应用，目的之二在于提供miR-34c-5p、miR-373-3p或/和miR-3074-5p作为microRNA分子标志物在制备类风湿关节炎的诊断试剂或试剂盒中的应用，以及分别检测miR-34c-5p、miR-373-3p或/和miR-3074-5p表达水平的引物的相关应用，还提供一种检测类风湿关节炎的诊断试剂盒。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1.circPTPN22作为分子标志物在制备类风湿关节炎的诊断试剂或试剂盒中的应用。

进一步，检测circPTPN22表达水平的引物在制备类风湿关节炎的诊断试剂或试剂盒中的应用。

进一步，检测circPTPN22表达水平的引物的序列为SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示。

2.检测miR-34c-5p表达水平的引物在制备类风湿关节炎的诊断试剂或试剂盒中的应用。

3.检测miR-373-3p表达水平的引物在制备类风湿关节炎的诊断试剂或试剂盒中的应用。

4.检测miR-34c-5p、miR-373-3p和miR-3074-5p表达水平的引物在制备类风湿关节炎的诊断试剂或试剂盒中的应用。

进一步，检测miR-373-3p表达水平的引物的序列为SEQ ID No.2；检测miR-34c-5p表达水平的引物的序列为SEQ ID No.3；检测miR-3074-5p表达水平的引物的序列为SEQ IDNo.4。

5.一种检测类风湿关节炎的诊断试剂盒，所述诊断试剂盒包括检测miR-34c-5p、miR-373-3p或/和miR-3074-5p表达水平的引物。