[发明专利]三叶苷在制备治疗急性肝损伤药物中的应用

说明书

本发明公开了三叶苷在制备治疗急性肝损伤的药物中的应用，属于药学领域。本发明通过构建D‑GalN/LPS诱导的小鼠急性肝损伤模型，给予不同浓度三叶苷后，发现三叶苷具有防治D‑GalN/LPS诱导的小鼠急性肝损伤的作用并呈剂量依赖性；说明可以用于制备治疗急性肝损伤药物中，进而为临床医学提供一种可行的新的技术方案。此外，本发明还发现三叶苷能够作为自噬诱导剂诱导细胞自噬。本发明拓展了三叶苷的功能范围，提供了三叶苷新的应用。本发明的实施为临床上治疗急性肝损伤提供了新的药物，为三叶苷进一步在产业上应用开拓了新的方向。

技术领域

本发明涉及药学领域，具体而言，涉及三叶苷在制备治疗急性肝损伤药物中的应用。

背景技术

急性肝损伤(acute liver injury,ALI)是一种多种病因(例如：缺血、药物、外源性毒物及其代谢产物和感染)引起的突发性疾病，严重的肝损伤最终会导致不可逆转的肝衰竭。因其发病率高、死亡率高的特点，严重影响患者的生活质量。ALI发病机制复杂，目前尚无理想的治疗药物。因此，迫切需要阐明急性肝损伤的发生机制，寻找安全、有效的治疗ALI的策略或药物。

自噬是指从粗面内质网的无核糖体附着区脱落的双层膜包裹部分胞质和细胞内需降解的细胞器、蛋白质等成分形成自噬体，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物，以实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。自噬是真核生物细胞中一种高度保守的代谢途径，在应激状态下能够维持机体细胞内平衡、细胞生存和内环境稳定起重要作用。迄今所有自噬研究中，LC3-I、LC3-II和Beclin 1均被用作自噬的标志物。其中，LC3是酵母Atg8的哺乳动物同源体。LC3前体被Atg4B加工形成LC3-I，经Atg5和Atg3催化，细胞溶质的LC3-I转变为一种膜结合形式即LC3-II。LC3-Ⅱ被募集并定位于自噬体膜上，直至自噬体和溶酶体相融合。Beclin 1主要参与自噬体的形成，其不仅能够介导其他自噬蛋白定位于自噬前体，还可以调节液泡分选蛋白34(valuo-lar protein sorting 34,Vps-34)，诱导beclin-Vps34-Vps15核心复合体形成，从而促进自噬。最近研究发现，自噬在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)/D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)诱导的ALI中发挥重要的调节作用。LPS/D-GalN联合注射更能模仿人类的急性爆发性肝衰竭的发生，因此，LPS/D-GalN诱导的动物模型是研究急性肝损伤最常用的模型。LPS/D-GalN作用于肝脏后，可诱导肝脏巨噬细胞释放大量促炎因子(如TNF-α、IL-1β、IL-6)，进而增加活性氧簇(reaction oxidative species,ROS)含量，引起氧化应激损伤。如果受损的细胞器没有通过适应性反应得到保护则会导致细胞死亡。而自噬则为一种适应性反应参与LPS/D-GalN诱导的ALI的调控并在其中发挥保护作用。主要依据如下：(1)在LPS/D-GalN诱导的ALI模型中，抑制肝脏特异性自噬会加重肝损伤；(2)在Atg5基因敲除小鼠模型腹腔注射LPS/D-GalN后，其急性肝损伤程度较野生型小鼠肝损伤加重。表明在LPS/D-GalN诱导的小鼠急性肝衰竭的早中期，肝细胞自噬逐渐增强可发挥保护作用。因此，寻找天然来源、安全、有效的自噬诱导剂防治ALI具有重要意义。

三叶苷(tilobatin)为一种已知化合物，分子式：C₂₁H₂₄O₁₀，其结构式为：

该化合物为多穗石柯植物的Lithocarpus polystachyus Rehd.的干燥茎叶提取物。已知该化合物具有抗病毒、抗缺血性脑卒中、抗老年痴呆等作用。此外，该化合物能够减少脂多糖诱导的巨噬细胞释放促炎因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)，并具有较强的抗氧化作用。但迄今尚无以三叶苷作为自噬诱导剂防治ALI的报道。

发明内容