[发明专利]一种检测日本沼虾体内重金属汞的方法

说明书

本发明公开了一种检测日本沼虾体内重金属汞的方法。本方法是采用适宜的时间和聚集诱导发光材料AIE探针浓度检测重金属汞在日本沼虾富集部位和毒性效应，通过聚集诱导发光材料与汞离子结合聚集，在一定的激光波长下发生红光对日本沼虾体内重金属汞进行实时在体检测。与传统汞离子检测方法相比，本方法无需解剖日本沼虾，安全较高，聚集诱导发光材料与汞离子结合峰值波长与其他金属离子不同，选择性较好并且操作简单，该方法可有效检测日本沼虾体内重金属汞及分布，对水产品食品安全及生态环境中水生动物的重金属汞检测具有一定的指导意义。

技术领域

本发明涉及一种基于聚集诱导发光材料荧光探针测量日本沼虾体内重金属汞的具体方法，属于水产养殖技术领域。

背景技术

重金属汞因其具有的生物富集性和神经毒性，在水生动物食物链普遍复杂于陆地动物食物链的情况下，对水产品汞含量的检测是食品安全中不容忽视的一环。并且水产品检测过程中干扰因素多，这就要求一种对水产品汞含量检测灵敏度高，抗干扰能力强，操作简便、快速的操作方法。现有的重金属检测方法常见的有原子吸收光谱法、分光光度法、原子荧光光谱法以及电感耦合等离子体质谱法等。其中原子荧光光谱法和原子吸收光谱法是当前检测食品中汞含量较为常用的一种方法，但是对于复杂样品的分析需要消除一定的干扰因素并且操作过程中需要一定的专业知识、熟练的实验操作和实验仪器。

近年来，一种有别于传统有机发光材料聚集猝灭特性的新型材料受到广泛关注，其具有的聚集诱导发光特性在医学、食品安全、生物科学等方面别广泛应用。相对于仪器分析法，采用荧光探针检测生物体内汞含量有着选择性强、抗干扰能力强、操作简便的优点，并且可追踪生物体内重金属汞分布情况。当前荧光探针检测生物体内汞含量多针对于藻类及单细胞动物，对结构复杂的生物体研究较少。因此本专利申请中所描述的采用新型荧光探针测量日本沼虾体内重金属汞对食品安全及追踪汞在机体内的富集规律等后续研究具有重大意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测日本沼虾重金属汞的方法。

为达到上述目的，本发明采取了如下的技术方案：

一种检测日本沼虾体内重金属汞的方法，包括如下步骤：

步骤1，聚集诱导发光材料溶解：称取适量聚集诱导发光材料荧光探针溶解于溶剂中，得到聚集诱导发光材料荧光探针储备液；

步骤2，聚集诱导发光材料分散系制作：取聚集诱导发光材料荧光探针储备液分散到去离子水中，得到聚集诱导发光材料荧光探针使用液；

步骤3，参数设定：采用激光扫描共聚焦显微镜对未被重金属汞污染的日本沼虾采用激发波长进行蓝光以及红光波段检测，并调节PMT的gain值至观察界面无明显荧光；

步骤4，样品检测：将样品浸泡于聚集诱导发光材料荧光探针使用液中20min-60min后，用去离子水清洗后，采用与步骤3中相同的激发波长与蓝光和红光波段进行检测。

进一步的，所述的检测日本沼虾体内重金属汞的方法，步骤1中采用的溶剂为二甲基亚砜、二甲基甲酰胺或异丙醇中的任意一种。

进一步的，所述的检测日本沼虾体内重金属汞的方法，步骤1中得到的聚集诱导发光材料荧光探针储备液的浓度为1-3mmol/L。

进一步的，所述的检测日本沼虾体内重金属汞的方法，步骤1中聚集诱导发光材料荧光探针包括四苯基乙烯(TPE)、六苯基噻咯（HPS）或TPBD中的任意一种。

进一步的，所述的检测日本沼虾体内重金属汞的方法，步骤2中聚集诱导发光材料荧光探针使用液的浓度为5-20μmol/L。

进一步的，所述的检测日本沼虾体内重金属汞的方法，步骤3中采用的激发波长为405nm。