[发明专利]一种达玛烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种达玛烷型三萜皂苷类化合物在作为或制备甜味剂或甜味增强剂中的应用，其中，所述达玛烷型三萜皂苷类化合物的结构通式如式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示：

在所述式(Ⅰ)中：R₁为H或β-D-木糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖基；R₂为OH、H、O中的任一种；R₃为H、OH、OMe、OOH，或者与β-D-木糖基、β-D-葡萄糖基、α-L-鼠李糖基、β-D-葡萄糖醛酸基中的任意一个或多个形成的糖链；其中，式(I)中的虚线为双键或单键；

在所述式(Ⅱ)中：R₁为H或β-D-葡萄糖基；R₂为H或乙酰基；R₃为H、β-D-葡萄糖基、β-D-木糖基、α-L-鼠李糖基、β-D-木糖基-(1→3)-α-L-鼠李糖基、α-L-鼠李糖基-(1→2)-β-D-木糖基或β-D-葡萄糖基-(1→3)-α-L-鼠李糖基中的任一种；R₄为OH、H、O中的任一种；其中，式(II)中的虚线为双键或单键；

其中，达玛烷型三萜皂苷类化合物为以下化合物中的任一种：

2.权利要求1所述的一种达玛烷型三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述达玛烷型三萜皂苷类化合物是从绞股蓝中分离得到；

其中，所述制备方法，包括如下步骤：

1)将绞股蓝茎叶粉碎后进行醇提处理，得到绞股蓝粗提物；对所述绞股蓝粗提物进行柱分离，点板合并流份，确定目标分离段；

2)将所述目标分离段溶解后，进行柱层析分离、梯度洗脱，回收溶剂后合并流份，得到流份A、流份B、流份C、流份D、流份E、流份F；

3)对所述流份C进行分离处理后，能得到化合物4、化合物9、化合物3、化合物7、化合物6、化合物14、化合物1、化合物2、化合物8；

4)对所述流份D进行分离处理后，能得到化合物5、化合物10、化合物11、化合物12、化合物13；

5)对所述流份E进行分离处理后，能得到化合物15、化合物16；

其中，所述绞股蓝为云南产绞股蓝；分离部位为绞股蓝地上部分。

3.权利要求2所述的一种达玛烷型三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，在所述步骤1)中：

用体积百分比为65-100％的甲醇-水溶液或者65-100％的乙醇-水溶液在30-70℃下，对粉碎后的绞股蓝地上部分回流提取，得到绞股蓝粗提物。

4.根据权利要求3所述的一种达玛烷型三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，

所述柱分离是采用正相硅胶柱，硅胶为200-300目；其中，所述正相硅胶柱分离时，采用的是石油醚-丙酮梯度洗脱溶剂系统；梯度系统中，石油醚：丙酮按体积比计分别为10:1、7:1、3:1和1:1、丙酮，按照每200g粗提物计，每个梯度20L，最后用10L甲醇洗脱。

5.根据权利要求3所述的一种达玛烷型三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，

所述点板合并流份处理为：将柱分离后的流份经薄层色谱TLC点板，合并得到8个流份，分别为：Fr1、Fr2、Fr3、Fr4、Fr5、Fr6、Fr7、Fr8；筛选出具有甜味的流份Fr8为目标分离段。

6.权利要求3所述的一种达玛烷型三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，在所述步骤2)中：

将所述目标分离段按照质量体积比(1-4):1g/ml溶解于水中，然后利用大孔吸附树脂进行柱层析分离。

7.根据权利要求6所述的一种达玛烷型三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂为7.7cm×65.5cm规格的Diaion HP-20。

8.根据权利要求6所述的一种达玛烷型三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于，梯度洗脱的溶剂系统中，甲醇：水按体积百分比计分别为0％、10-30％、30-50％、50-70％、70-100％，每个溶液梯度8L。