[发明专利]一种功能核酸磁生物传感器

权利要求书

1.一种功能核酸磁生物传感器，其特征在于，包括：

（1）隔断超速聚合酶链式反应BS-PCR扩增体系；

（2）功能核酸磁层析分析体系；

所述传感器的检测体系用于对待测样品依次经由所述BS-PCR扩增体系进行反应后所得产物进行功能核酸磁层析分析；

其中，所述BS-PCR扩增体系包括：正向隔断接头引物、反向隔断接头引物；

所述正向隔断接头引物为：5’-TTGGTCGTGGTGGTGGTTT-隔断物-ACAGCCACCACTTCTCCTTG-3’

所述反向隔断接头引物为：5’-CCTTCCCTCTTCCCCCC-隔断物-CGGAAATGAAAGAAGGCTACCG-3’；

所述隔断物为具有长链结构的化合物；

其中，所述正向隔断接头引物和所述反向隔断接头引物5’端均包括通用接头序列，分别为：5’端通用接头序列A和5’端通用接头序列A’：

5’端通用接头序列A：5’-TTGGTCGTGGTGGTGGTTT

5’端通用接头序列A’：5’-CCTTCCCTCTTCCCCCC；

所述功能核酸磁层析分析体系包括：层析缓冲液、磁信号探针、功能核酸检测试纸和功能核酸磁层析检测仪。

2.根据权利要求1所述的传感器，其特征在于，所述BS-PCR扩增体系中，正向隔断接头引物浓度为1-5μM、反向隔断接头引物浓度为1-5μM。

3.根据权利要求2所述的传感器，其特征在于，所述BS-PCR的反应过程包括：95-98℃，0-10s；55-65℃，0-10s，共25-40个循环。

4.根据权利要求3所述的传感器，其特征在于，所述BS-PCR扩增体系中，正向隔断接头引物浓度为2μM、反向隔断接头引物浓度为2μM；所述BS-PCR反应过程包括：96℃，4s；60℃，6s，共30个循环。

5.根据权利要求2-4中任一项权利要求所述的传感器，其特征在于，所述隔断物为聚六乙二醇。

6.根据权利要求1所述的传感器，其特征在于，所述磁信号探针为表面修饰了单链核酸序列C的磁性纳米颗粒；

所述功能核酸检测试纸的检测线处修饰了单链核酸序列D，质控线处修饰了单链核酸序列D’；

单链核酸序列D与通用接头序列A部分或全部互补配对；

单链核酸序列D’与通用接头序列A’部分或全部相同；

单链核酸序列D’与通用接头序列A’分别与修饰在磁性纳米颗粒表面的单链核酸序列C部分或全部互补配对。

7.根据权利要求1或6所述的传感器，其特征在于，所述功能核酸磁层析分析过程包括：将2-3μL BS-PCR反应所得产物与80-120μL的层析缓冲液混合形成待检样品，将1-3μL的磁信号探针加载到功能核酸检测试纸的结合垫上，将检测试纸插入待检样品中，待3-10分钟后试纸的检测线由无色变为棕色，肉眼进行观察，取出试纸放入功能核酸磁层析检测仪中测定磁信号强度。

8.根据权利要求7所述的传感器，还包括下述1）-2）中的至少一种：

1）所述磁信号探针为序列表中SEQ ID NO：7所示的核苷酸序列通过相互作用修饰在磁性纳米颗粒表面后得到的探针；

2）所述功能核酸检测试纸为：将序列表中SEQ ID NO：8所示的核苷酸序列通过相互作用修饰在检测线处，将序列表中SEQ ID NO：9所示的核苷酸序列通过相互作用修饰在质控线处所得到的检测试纸。

9.权利要求1-8中任一项权利要求所述的传感器在检测双链核酸靶标方面中的应用。