[发明专利]用于诊断抗AMA-M2抗体阳性与阴性PBC患者的糖链标志物及其用途

说明书

本发明通过采用含有56种凝集素的凝集素芯片检测PBC中抗AMA‑M2抗体阳性患者与阴性患者血清IgG与凝集素特异性结合的聚糖差异。结果显示，与阴性患者相比，ABA和GNL凝集素结合聚糖的含量在抗AMA‑M2抗体阳性患者中是降低的。由于ABA凝集素是特异性结合半乳糖，GNL凝集素是特异性结合甘露糖，这表明半乳糖和甘露糖水平在抗AMA‑M2抗体阳性患者中的表达是减少的。凝集素免疫印迹验证结果表明，ABA和GNL凝集素结合聚糖的含量在抗线粒体抗体AMA‑M2阳性患者中依然是降低的。可见，ABA凝集素与IgG结合所形成的复合物和/或GNL凝集素与IgG结合所形成的复合物可作为用于诊断抗AMA‑M2抗体阳性PBC患者与抗AMA‑M2抗体阴性PBC患者的糖链标志物。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种用于诊断抗AMA-M2抗体阳性PBC患者与抗AMA-M2抗体阴性PBC患者的糖链标志物及其用途。

背景技术

原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis，PBC)，是一种自身免疫性疾病，其特征在于慢性炎症和肝内胆管破坏。PBC主要在中年女性中观察到。PBC患者通常表现出异常的肝脏检查，包括碱性磷酸酶(ALP)升高，γ谷氨酰转肽酶(GGT)以及症状的组合，包括瘙痒，疲劳和门静脉高压症。抗线粒体抗体(AMA)是PBC的血清学标志，在将近95％的患者中发现。血清AMA，尤其是AMA-M2亚型，被认为是PBC最具体，最可接受的诊断指标之一。AMA-M2在PBC中的敏感性和特异性很高，可高达84.5/97.8％。无PBC临床症状但AMA阳性的人群极有可能发展为PBC。研究表明仍有5％～l0％的PBC患者血清AMA阴性，AMA阴性和阳性PBC患者临床表现相同，但AMA阴性患者预后更差且表现出更严重的胆管损伤、CD4细胞在导管区浸润增加和胆管损伤早期的B细胞浸润增加。

IgG是人体内含量最丰富的抗体。它参与多种体液免疫过程：抗原中和、补体激活和补体依赖性细胞毒(CDC)、抗体依赖性细胞介导的细胞毒(ADCC)和超敏反应。多糖是由多达15个单糖残基组成的复杂低聚糖，约占IgG重量的15％，是IgG不可分割的部分，它组成的变化会影响IgG的结构稳定性、构象和半衰期，以及它的效应器功能。事实上，如果多糖完全去除会导致IgG促炎活性和抗炎活性的丧失。自从在类风湿性关节炎患者中发现IgG糖基化异常改变后，已有越来越多的证据表明IgG糖基化在自身免疫性疾病中发挥着重要的作用。

本研究拟通过高通量的糖基化分析技术——凝集素微阵列技术来检测抗AMA-M2亚型阳性患者与阴性患者血清IgG糖基化修饰差异，以期探讨糖基化两者在PBC中的临床应用价值。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种用于诊断抗AMA-M2抗体阳性PBC患者与抗AMA-M2抗体阴性PBC患者的糖链标志物及其用途。

首先，本发明提供一种用于诊断抗AMA-M2抗体阳性PBC患者与抗AMA-M2抗体阴性PBC患者的糖链标志物，其为ABA凝集素与IgG结合所形成的复合物和/或GNL凝集素与IgG结合所形成的复合物。

其中，所述的IgG含有半乳糖和/或甘露糖。

其次，本发明还提供所述糖链标志物在用于制备诊断抗AMA-M2抗体阳性PBC患者与抗AMA-M2抗体阴性PBC患者的试剂中的用途。

具体地，所述诊断包括：测定待测的生物样品中ABA凝集素与IgG结合所形成的复合物和/或GNL凝集素与IgG结合所形成的复合物水平；任选地，

与对照数据比较所述生物样品中ABA凝集素与IgG结合所形成的复合物的水平和/或GNL凝集素与IgG结合所形成的复合物的水平，其中，相对于所述对照数据，所述样品中ABA凝集素与IgG结合所形成的复合物的水平和/或GNL凝集素与IgG结合所形成的复合物的水平可检测地降低表明生物样品来自PBC抗AMA-M2抗体阳性的可能性，

其中，所述生物样品为血清样品。