[发明专利]一种ZIF-8固定硝基还原酶的制备方法及其应用方法在审
| 申请号： | 202110189023.1 | 申请日： | 2021-02-19 |
| 公开（公告）号： | CN113151243A | 公开（公告）日： | 2021-07-23 |
| 发明（设计）人： | 黄和;沈宝星;张幸;李昺之;戴嘉楠;冯田田 | 申请（专利权）人： | 南京师范大学 |
| 主分类号： | C12N11/089 | 分类号： | C12N11/089;C12N9/04 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 张华蒙 |
| 地址： | 210024 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 zif 固定 硝基 还原酶 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种ZIF-8固定硝基还原酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)采用醋酸锌和2-甲基咪唑分别配制醋酸锌溶液、2-甲基咪唑溶液，将硝基还原酶溶于超纯水得到硝基还原酶溶液；
(2)取2-甲基咪唑溶液于离心管中，加入硝基还原酶溶液，最后加入醋酸锌溶液混匀，静置混合液12h-14h；
(3)将静置后的混合液离心得ZIF-8固定硝基还原酶。
2.根据权利要求1所述的一种ZIF-8固定硝基还原酶的制备方法，其特征在于：所述的步骤(3)，混合液离心的条件为：7000-9000rpm，离心时间5-7min。
3.根据权利要求1所述的一种ZIF-8固定硝基还原酶的制备方法，其特征在于：所述的步骤(1)中，所述的醋酸锌和2-甲基咪唑的摩尔比为1:16。
4.根据权利要求1所述的一种ZIF-8固定硝基还原酶的制备方法，其特征在于：所述的步骤(1)中，所述的醋酸锌溶液浓度为52.7mg/mL，2-甲基咪唑溶液的浓度为0.1581g/mL；所述的硝基还原酶溶液的浓度为0.1mg/mL。
5.权利要求1-4中任意一项制备的ZIF-8固定硝基还原酶的应用方法，其特征在于：包括如下步骤：
1)将对硝基苯酚、NADH和ZIF-8固定硝基还原酶混匀后反应，溶于PBS缓冲溶液中，得到混合溶液；
2)将步骤1)的混合溶液置于离心管中，恒温金属浴中反应，最后测量上清液体的的吸光度。
6.根据权利要求5所述的ZIF-8固定硝基还原酶的应用方法，其特征在于：所述的步骤1)中，反应温度为37℃-100℃。
7.根据权利要求5所述的ZIF-8固定硝基还原酶的应用方法，其特征在于：所述的步骤2)中，混合溶液反应的pH为3-10。
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