[发明专利]一种培养犬瘟热病毒和犬细小病毒的方法及应用在审
申请号: | 202110190109.6 | 申请日: | 2021-02-18 |
公开(公告)号: | CN112795530A | 公开(公告)日: | 2021-05-14 |
发明(设计)人: | 范金秀;徐高原;蔡潮;焦利红;韦阳飞;谢月娇;刘新颖;明静芳;陈亮;陈关平;韩进;洪灯 | 申请(专利权)人: | 武汉科前生物股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N7/00;C12N7/02 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 钱云 |
地址: | 430206 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 培养 犬瘟热 病毒 细小 方法 应用 | ||
1.一种培养犬瘟热病毒和犬细小病毒的方法,其特征在于,包括:
以Vero细胞作为犬瘟热病毒的宿主,以F81细胞作为犬细小病毒的宿主,通过生物反应器进行培养;
所述生物反应器中载体为片状载体。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述片状载体为聚酯纤维片状载体。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述生物反应器为固定床篮式搅拌桨反应器。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述Vero细胞在进行培养前的接种密度为4-5×105cell/mL;和/或,
所述F81细胞在进行培养前的接种密度为3-4×105cell/mL。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述Vero细胞和所述F81细胞在培养时用的培养基均为包含1.8%~2.2%新生牛血清的199培养基,pH为7.0~7.2。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述Vero细胞的培养条件为:
培养温度35~35.5℃,pH为7.0-7.2,搅拌转速为45-55rpm,溶氧为40-50%;和/或,
所述F81细胞的培养条件为:
培养温度37~37.5℃,pH为7.0-7.2,搅拌转速为45-55rpm,溶氧为40-50%。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述犬瘟热病毒的接种量为0.01~0.02MOI;和/或,所述犬细小病毒的接种量为0.04~0.06MOI。
8.根据权利要求1-7任一项所述的方法,其特征在于,所述犬瘟热病毒在培养72~84h后收获;和/或,所述犬细小病毒在培养144~156h后收获。
9.权利要求1-8任一项所述的方法在制备用于免疫犬瘟热病毒或犬细小病毒的药物中的应用。
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