[发明专利]基于环介导等温扩增技术鉴定大青褶伞的引物组、试剂盒和方法在审
申请号: | 202110190526.0 | 申请日: | 2021-02-18 |
公开(公告)号: | CN112852992A | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 陈爱亮;王楠;高洁;张娟;谢瑞彬;于文杰 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 余菲 |
地址: | 100000 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 环介导 等温 扩增 技术 鉴定 大青 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种基于环介导等温扩增技术鉴定大青褶伞的引物组,其特征在于,所述引物组包括:外引物对、内引物对以及环引物;其中,所述外引物对包括核酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4的引物,所述内引物对包括核酸序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3的引物,所述环引物的核酸序列如SEQ ID NO.5所示。
2.权利要求1所述的引物组在鉴定大青褶伞中的应用。
3.一种鉴定大青褶伞的试剂盒,其特征在于,其包括权利要求1所述的引物组。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括LAMP反应液;所述LAMP反应液含有:0.58-0.62μM所述外引物对、4.6-5.0μM所述内引物对和1.8-2.2μM所述环引物。
5.一种基于环介导等温扩增技术鉴定大青褶伞的方法,其特征在于,其包括:将提取自待测样品的核酸模板与权利要求1所述的引物组混合,进行LAMP反应。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,进行LAMP反应的反应体系中,所述外引物对的浓度为0.58-0.62μM;所述内引物对的浓度为4.6-5.0μM;所述环引物的浓度为1.8-2.2μM。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,进行LAMP反应的反应体系中含有酚红染料和Bst DNA聚合酶。
8.根据权利要求5-7任一项所述的方法,其特征在于,进行LAMP反应的反应温度为61-65℃。
9.根据权利要求5-7任一项所述的方法,其特征在于,所述待测样品为蘑菇、呕吐物或粪便。
10.根据权利要求5-7任一项所述的方法,其特征在于,所述核酸模板为基因组DNA。
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