[发明专利]基于环介导等温扩增技术鉴定大青褶伞的引物组、试剂盒和方法在审

专利信息
申请号: 202110190526.0 申请日: 2021-02-18
公开(公告)号: CN112852992A 公开(公告)日: 2021-05-28
发明(设计)人: 陈爱亮;王楠;高洁;张娟;谢瑞彬;于文杰 申请(专利权)人: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645
代理公司: 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 代理人: 余菲
地址: 100000 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 基于 环介导 等温 扩增 技术 鉴定 大青 引物 试剂盒 方法
【权利要求书】:

1.一种基于环介导等温扩增技术鉴定大青褶伞的引物组,其特征在于,所述引物组包括:外引物对、内引物对以及环引物;其中,所述外引物对包括核酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4的引物,所述内引物对包括核酸序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3的引物,所述环引物的核酸序列如SEQ ID NO.5所示。

2.权利要求1所述的引物组在鉴定大青褶伞中的应用。

3.一种鉴定大青褶伞的试剂盒,其特征在于,其包括权利要求1所述的引物组。

4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括LAMP反应液;所述LAMP反应液含有:0.58-0.62μM所述外引物对、4.6-5.0μM所述内引物对和1.8-2.2μM所述环引物。

5.一种基于环介导等温扩增技术鉴定大青褶伞的方法,其特征在于,其包括:将提取自待测样品的核酸模板与权利要求1所述的引物组混合,进行LAMP反应。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,进行LAMP反应的反应体系中,所述外引物对的浓度为0.58-0.62μM;所述内引物对的浓度为4.6-5.0μM;所述环引物的浓度为1.8-2.2μM。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,进行LAMP反应的反应体系中含有酚红染料和Bst DNA聚合酶。

8.根据权利要求5-7任一项所述的方法,其特征在于,进行LAMP反应的反应温度为61-65℃。

9.根据权利要求5-7任一项所述的方法,其特征在于,所述待测样品为蘑菇、呕吐物或粪便。

10.根据权利要求5-7任一项所述的方法,其特征在于,所述核酸模板为基因组DNA。

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