[发明专利]一种Serpine2基因小鼠模型构建方法与应用在审
| 申请号： | 202110198446.X | 申请日： | 2021-02-20 |
| 公开（公告）号： | CN112813026A | 公开（公告）日： | 2021-05-18 |
| 发明（设计）人： | 柴人杰;陈蔚;张莎莎;程诚;高下 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | C12N5/0797 | 分类号： | C12N5/0797;C12N5/071;C12N15/12;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) 11357 | 代理人： | 饶富春 |
| 地址： | 210024 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 serpine2 基因 小鼠 模型 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种Serpine2基因小鼠模型构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
培养初代OC细胞；
通过siRNA敲减所述OC细胞中的Serpine2基因；
取新生Lgr5-EGFP小鼠耳蜗，放入培养液中培养，并消化成单细胞；从含有Lgr5-EGFP细胞的单细胞悬液中分选出Lgr5+细胞；用所述siRNA敲除Lgr5+细胞中的Serpine2基因；
培养Serpine2基因敲减的Lgr5+细胞，观察并记录成球细胞的数量和直径；
培养第一代所述成球细胞，用EdU染色以及DAPI、Myo7a抗体标记染色，观察毛细胞分化的情况。
2.根据权利要求1所述的小鼠模型构建方法，其特征在于，所述培养液中含有DMEM/F12、B27、N2、IGF、EGF、b-FGF、肝素与氨苄青霉素。
3.根据权利要求1所述的小鼠模型构建方法，其特征在于，通过流式细胞分选法分选出Lgr5+细胞。
4.根据权利要求1所述的小鼠模型构建方法，其特征在于，通过RT-qPCR技术检测所述初代OC细胞中的Serpine2基因的敲减效率。
5.根据权利要求1所述的小鼠模型构建方法，其特征在于，采用N1301、N885、N1082三种不同的siRNA敲减所述OC细胞中的Serpine2基因。
6.一种权利要求1～2所述小鼠模型构建方法在研究毛细胞再生中的应用。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于东南大学，未经东南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110198446.X/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种拉丝润滑粉加工生产用定量投料装置
- 下一篇：转子冲片、转子结构及电机
