[发明专利]一种慢生型大豆根瘤菌高密度培养方法在审
| 申请号： | 202110198467.1 | 申请日： | 2021-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN112940973A | 公开（公告）日： | 2021-06-11 |
| 发明（设计）人： | 于德水;甄涛;周舒扬;赵晓宇 | 申请（专利权）人： | 黑龙江省科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/41 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 邓宇 |
| 地址： | 150001 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 慢生型 大豆 根瘤菌 高密度 培养 方法 | ||
1.一种慢生型大豆根瘤菌高密度培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)发酵罐培养慢生型大豆根瘤菌48-60h，使其处于对数生长期；
(2)慢生型大豆根瘤菌进入对数生长期后，采用恒速流加补料方式进行补料，补料液的流加速度为1mL/min，1L补料液中含有碳源和氮源的总质量为100g，补料时间为10-12h。
2.根据权利要求1所述的一种慢生型大豆根瘤菌高密度培养方法，其特征在于，所述的步骤(1)中发酵罐培养慢生型大豆根瘤菌的条件为：空气流速20L/min，搅拌转速不低于400rpm，溶解氧饱和浓度不低于85％，温度为28℃，初始pH值为6.8。
3.根据权利要求1所述的一种慢生型大豆根瘤菌高密度培养方法，其特征在于，所述的步骤(1)中发酵罐培养慢生型大豆根瘤菌的培养基为YMA培养基，1L培养基中含有K2HPO40.5g、MgSO4 0.2g、NaCl 0.1g、酵母粉0.4g、甘露醇10g和琼脂20g。
4.根据权利要求1所述的一种慢生型大豆根瘤菌高密度培养方法，其特征在于，所述的步骤(2)中采用恒速流加补料方式进行补料的起点为培养慢生型大豆根瘤菌48h。
5.根据权利要求1所述的一种慢生型大豆根瘤菌高密度培养方法，其特征在于，所述的步骤(2)中采用甘露醇和酵母膏在补料液中的比例调整来保证发酵罐中碳氮比。
6.根据权利要求5所述的一种慢生型大豆根瘤菌高密度培养方法，其特征在于，所述的补料液中甘露醇和酵母膏的浓度比为3:2。
7.根据权利要求1所述的一种慢生型大豆根瘤菌高密度培养方法，其特征在于，所述的慢生型大豆根瘤菌为大豆根瘤菌HW-05。
8.权利要求1所述的培养方法培养的慢生型大豆根瘤菌，其特征在于，慢生型大豆根瘤菌的最终有效活菌数为6.8×109cfu/mL。
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