[发明专利]一种高效液相色谱串联质谱法测定白坚木皮醇的方法

说明书

本发明公开了一种高效液相色谱串联质谱法测定白坚木皮醇的方法。所述的高效液相色谱串联质谱测定白坚木皮醇的色谱分离柱选择为氨基色谱分离柱。本发明的色谱分离柱选择氨基柱，流动相配方包括水和乙腈按照不同比例进行梯度洗脱，可实现白坚木皮醇的良好分离效果，并有较高的柱效。本发明提供的高效液相色谱串联质谱测定白坚木皮醇的方法，可简单、快速、高效地对白坚木皮醇进行定性和定量检测，有效提高白坚木皮醇的检测灵敏度，在0.005～1mg/L浓度范围内表现出良好的线性，线性相关系数为0.9993，峰型良好，加标回收率高。

技术领域

本发明属于质谱分离小分子化合物领域，具体涉及一种高效液相色谱串联质谱法测定白坚木皮醇的方法。

背景技术

白坚木皮醇［2-甲氧基-L-(－) -手性-肌醇］，又称白雀木醇，是植物维持渗透压的主要成分。研究表明，白坚木皮醇具有一定的冷冻保护能力，可作为鹰嘴豆和菠菜的植物保护剂。白坚木皮醇是荔枝光合作用主要产物和韧皮部碳水化合物运输的主要形式，是大型木本荔枝低耗、节能和高抗生物胁迫的碳素代谢策略。白坚木皮醇也是一种具有旋光活性的药用天然化合物，可作为治疗、保健等药物，如在美容护肤膏、洗发香波、洗澡香皂中加入一定量的白坚木皮醇，使用后可令人体肌肤滋润、光泽、去皱纹和增加弹性；此外，白坚木皮醇还具有清除氧自由基的特殊功效。白坚木皮醇可减轻6-羟多巴胺对老鼠胎儿中脑细胞悬浮系的毒性，抑制血小板的凝集，还可以作为前体合成无毒、无害而有特效的手性药物，用于治疗癌症、早期痴呆症、糖尿病和艾滋病等疾病及美容保健。近年来白坚木皮醇被广泛应用于医药原料和保健品，其质量控制直接影响医药和保健品的质量水平。因此，白坚木皮醇含量的测定方法尤为重要。

由于白坚木皮醇属于强极性的亲水化合物，分子量小、紫外吸收弱，很难用GC、GC-MS、HPLC等仪器检测。已有报道采用高效液相色谱法配示差折光检测器、二极管阵列检测器、蒸发光散射检测器以及GC-MS分析白坚木皮醇，液相色谱的传统反相色谱柱（C18柱）很难达到良好的分离效果，尽管有报道采用ZIC-HILIC色谱柱可实现白坚木皮醇分离，但检出限仅为10～80mg/L，完全达不到微量检测目的；使用气质联用仪检测需要预先将样品进行复杂的衍生化反应，费时费力。目前缺乏一种快速、方便、准确地检测白坚木皮醇含量的仪器方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种简单、快速、准确的检测白坚木皮醇含量，线性关系良好，加标回收率高，并可获得白坚木皮醇的良好峰型的高效液相色谱串联质谱法。

本发明的高效液相色谱串联质谱法测定白坚木皮醇的方法，包括以下步骤：

所述的高效液相色谱串联质谱测定白坚木皮醇的色谱分离柱选择为氨基色谱分离柱。

优选，所述的高效液相色谱串联质谱测定白坚木皮醇，其流动相为：

A相：水；

B相：乙腈。

其中，梯度洗脱程序如下：在0～1.0min内，流动相水和乙腈的体积比为10:90；在2～5min内，流动相水和乙腈的体积比由10:90匀速渐变至85:15；在5～6min内，流动相水和乙腈的体积比由85:15匀速渐变至10:90，保持2min。

优选，所述的质谱，其质谱条件为：选择质核比m/z=84.9和m/z=161.0作为定性定量离子对；流速为0.7mL/min；柱温为35℃；ESI离子源负模式，雾化气流量2.0mL/min，干燥气和加热气流量均为10.0mL/min，接口温度300°C，脱溶剂温度526°C，加热块温度400°C，雾化气为氮气，碰撞气为氩气，碰撞能量分别为22v、12v。