[发明专利]一种甘油解反应制备偏甘油酯的方法

权利要求书

1.一种甘油解反应制备偏甘油酯的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备Lipase MAS1突变体的固定化脂肪酶，Lipase MAS1突变体为MAS1-H108A，其氨基酸序列如SEQ NO.2所示；

(2)酶催化甘油解反应制备偏甘油酯，按质量份计：将1～10份植物油，1～4份的甘油，0～40份有机相试剂，与0.2～1.5份Lipase MAS1突变体的固定化脂肪酶混合，在40～55℃的温度下反应1～6小时，得到产物混合物；

(3)产物混合物经分离得到偏甘油酯；

所述固定化脂肪酶使用的固定化载体为ECR8285。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述固定化脂肪酶的制备，按质量份计：取3～10份固定化载体，6～20份质量的Tris-HCL缓冲液，0.3～1.5份的LipaseMAS1的突变体混合，在25～35℃下混合搅拌吸附3～5个小时，然后过滤并干燥，得到LipaseMAS1突变体的固定化脂肪酶。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述固定化载体经如下预处理：首先要经过95％的乙醇浸泡24小时，使用蒸馏水水洗至中性；再用5％HCL浸泡24小时，之后使用蒸馏水水洗至中性；再用3％NaOH浸泡24小时，之后再使用蒸馏水水洗至中性备用即可。

4.根据权利要求3所述的方法，所述Tris-HCL缓冲液浓度为0.03～0.05mol/L，pH为7.3～7.7。

5.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，步骤(2)的反应体系中水分含量不高于0.05％；固定化脂肪酶加量为底物总质量的2％～15％；植物油与甘油的摩尔比为1：(1～5)；有机相试剂加量为底物总质量的1.5～4倍。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述有机相试剂为叔丁醇，有机相试剂为15～30份。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述反应在气浴摇床转速为150±50rpm/min的条件下进行。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤(3)中分离是指所得混合物经过高速离心分离后，得到上层油脂，再经过多级分子蒸馏，即可得到高纯度的偏甘油酯产品； 所述离心分离的转速为8000～12000r/min，持续时间为3～5min，所述分子蒸馏蒸发温度为140±20℃，真空压力为10±5Pa。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述植物油为大豆油，芝麻油，棕榈油，花生油，玉米油，葵花籽油，椰子油，橄榄油，亚麻籽油，山茶籽油，棕榈仁油，棉籽油，红花籽油，稻米油中一种或几种的混合物。